过表达白血病抑制因子增强子宫内膜癌细胞对化疗药物的耐受
阮晓红1
钟媚共2
刘婉敏1
刘琼茹3
陆文洁4
郑焱5
张鑫6
1.江门市中心医院 妇科,广东 江门 5290302.江门市妇幼保健院药学部,广东 江门5290003.江门市中心医院病理科,广东 江门 5290304.江门市中心医院中心实验室,广东 江门 5290305.广东省人乳头状瘤病毒(HPV)相关疾病分子诊断工程技术研究开发中心,广东 潮州 5210216.江门市中心医院病理科,广东 江门 529030;江门市中心医院中心实验室,广东 江门 529030
摘要：目的 探讨在体外环境中,子宫内膜癌细胞高表达白血病抑制因子(LIF)后,对顺铂及紫杉醇的敏感性变化.方法 利用慢病毒在子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)中建立稳定过表达LIF的细胞模型,以空载体慢病毒感染细胞作为对照组,用逆转录荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验验证LIF的表达.利用CCK-8观察LIF过表达对癌细胞活性的影响,利用Annexin V-FITC/PI法和JC-1法观察LIF过表达后,顺铂及紫杉醇诱导癌细胞凋亡及线粒体膜电位下降的情况.利用免疫印迹观察LIF过表达后,癌细胞中Bcl-2家族及STAT3通路蛋白的表达.利用荧光素酶报告基因活性检测观察LIF过表达后,癌细胞STAT3转录活性的变化.在过表达LIF的两子宫内膜癌细胞中沉默STAT3,以无义小干扰RNA序列转染细胞为对照组,观察顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用.结果 过表达组的子宫内膜癌细胞(HEC-1B和RL95-2)较对照组表达更高水平的HLF mRNA及分泌更多的HLF蛋白(P<0.05).LIF的过表达不影响两子宫内膜癌细胞的体外增殖活性(P>0.05),但能增加癌细胞在顺铂及紫杉醇作用下的存活率和线粒体膜电位(P<0.05).过表达LIF能增加两子宫内膜癌细胞中Bcl-2、Bcl-xL和p-STAT3的水平,降低Bax和Bad的水平,而不影响STAT3的水平;同时STAT3的转录活性增强(P<0.05).在稳定表达LIF的两子宫内膜癌细胞中,沉默STAT3能显著增加顺铂及紫杉醇对细胞的杀伤作用(P<0.05).结论 在体外环境中,稳定高表达LIF能增强宫内膜癌细胞对顺铂及紫杉醇的抵抗.
关键词：子宫内膜癌白血病抑制因子顺铂紫杉醇STAT3信号通路
资助基金：国家自然科学基金(81802918)广东省自然科学基金(2019A1515011565)广东省自然科学基金(2018A030310007)广东省医学科研基金(A2017103)广东省中医药局科研项目(20181273)科研启动基金(J201801)科研启动基金(D201801)
论文发表日期：2020-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 20-26 )
英文信息