孕烷X受体可上调HepG2细胞内PDCD4的表达
王少兰
李涛
杜婧
韩曼
鞠迪
1.陕西中医药大学基础医学院,陕西西安7120462.陕西中医药大学基础医学院,陕西西安7120463.陕西中医药大学基础医学院,陕西西安7120464.陕西中医药大学基础医学院,陕西西安7120465.陕西中医药大学基础医学院,陕西西安712046
摘要：目的 探究孕烷X受体(PXR)对HepG2细胞程序性细胞死亡因子(PDCDs)的调控作用及其分子机制.方法 HepG2细胞给予不同的PXR激动剂刺激24h,分为利福平(10 μmol/L)组、SR12813(1 μmol/L)组和DMSO对照组;采用持续激活型PXR的腺病毒感染HepG2细胞(VP-PXR组和Mock对照组)36 h.应用qRT-PCR技术检测PDCD2、PDCD4、PDCD5、PDCD6基因以及miRNA21的表达变化,采用Western blot技术检测PDCD4的蛋白表达水平.运用生物信息学方法预测PDCD4启动子区存在的潜在PXR结合反应元件(PXREs).结果 qRT-PCR结果显示利福平与对照组相比,PDCD2的表达显著下调(t=-2.875,P＜0.05),PDCD4表达则显著上调(t=4.209,P＜0.01),而PDCD5和PDCD6无明显差异.SR12813与对照组相比,PDCD4表达明显升高(t=4.574,P＜0.01),PDCD2、PDCD5和PDCD6均无明显变化.同时,利福平、SR12813组与对照组相比,PXR经典靶基因MDR1的表达显著升高(P＜0.05);VP-PXR与Mock对照组相比,PDCD2和PDCD6的基因表达无明显差异,PDCD4基因的表达则显著上调(t=3.343,P＜0.05),MDR1的表达也显著升高(t=3.343,P＜0.01);给予利福平刺激后,PDCD4的蛋白表达比对照组显著升高(t=2.779,P＜0.05);PDCD4的蛋白在VP-PXR组也显著高于Mock组(t=3.066,P＜0.05);机制研究发现利福平或VP-PXR腺病毒刺激细胞后与各自对照组相比,PDCD4上游负调控因子miRNA21表达均无明显差异.利用生物信息学软件分析后发现,PDCD4启动子区存在PXREs.结论 PXR活化上调HepG2细胞内PDCD4的表达,但不依赖于miRNA21,PDCD4在HepG2细胞可能是PXR的靶基因.
关键词：孕烷X受体PDCD4miRNA21HepG2细胞
资助基金：国家自然科学基金(81904038)陕西省自然科学基金(2017JQ8023)陕西中医药大学针药结合防治冠心病临床基础研究创新团队(2019-YS06)
论文发表日期：2020-03-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 370-375 )
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