肠道病毒71型能诱导THP-1巨噬细胞的自噬和凋亡
罗文英1
杨拉维2
潘庆军3
邱丽红1
1.广东医科大学附属医院检验科,广东湛江5240012.广东医科大学附属医院临床研究中心,广东湛江5240013.广东医科大学附属医院肾病研究所,广东湛江524001
摘要：目的 探讨肠道病毒71型(EV71)诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡及其相关信号通路.方法 设置EV71处理组和DMEM对照组,EV71处理组是用感染复数0.1感染THP-1巨噬细胞2、8和16h,对照组是用DMEM培养基作为阴性对照即是0h组.CCK-8检测EV71对THP-1巨噬细胞增殖和毒性的影响;荧光定量PCR法检测EV71在细胞内病毒核酸变化情况;透射电镜观察THP-1巨噬细胞内超微结构变化;Hoechst 33342染色法和AnnexinV/PI双染法检测EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡的情况;免疫印迹法分析EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬和凋亡相关蛋白水平的变化;用3-MA和Ac-DEVD-CHO抑制剂分别检测EV71对THP-1巨噬细胞自噬和凋亡的影响.结果 EV71作用THP-1巨噬细胞2、8和16h的细胞存活率逐渐下降(P＜0.05);细胞内病毒核酸拷贝数逐渐增多(P＜0.01);可见细胞内自噬小体和病毒颗粒;总细胞凋亡率逐渐增加(P＜0.01);与对照组比较,EV71处理组LC3转化量(LC3-II/LC3-I)逐渐增多,而p62蛋白逐渐减少,cleaved caspase3蛋白增多,Bcl-2和caspase-3蛋白减少(P＜0.01),而cleaved caspase-8无差异(P＞0.05);与PBS对比,在8h时3-MA明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞自噬,LC3-II/LC3-I比值减少,而p62蛋白增多(P＜0.01);与DMSO对比,Ac-DEVD-CHO明显抑制EV71诱导THP-1巨噬细胞凋亡,凋亡率分别为15.5％和7.7％(P＜0.01).结论 EV71能感染THP-1巨噬细胞并在其中复制,且能诱导自噬和凋亡,其可能与激活LC3/p62自噬途径和caspase凋亡途径有关.
关键词：肠道病毒71型THP-1巨噬细胞自噬凋亡
资助基金：国家自然科学基金(81301478)广东省卫生厅项目(B2017055)
论文发表日期：2020-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 828-836 )
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