下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡
姚言雪
董淑英
朱晨露
胡淼
杜宝龙
童旭辉
1.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠2330302.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠2330303.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠2330304.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠2330305.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠2330306.蚌埠医学院药学院,安徽蚌埠233030
摘要:目的 探讨Pannexin2(Panx-2)蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平以及干扰Panx-2表达对顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡的影响.方法 免疫印迹法Panx-2蛋白在睾丸癌细胞中的表达水平;以睾丸癌I-10细胞株为研究对象,实验分为转染试剂对照组(mork组)、阴性对照质粒组(NC组)、干扰Panx-2组(shRNA1质粒组和shRNA2质粒组),采用免疫印迹法验证Panx-2的表达;在转染细胞中添加16 μmol/L的顺铂诱导细胞死亡,通过MTT法分别检测细胞在24、48、72 h的存活率,集落克隆法检测细胞的集落形成能力;在顺铂(16 μmol/L)处理8h后,采用AnnexinV/PI双染法检测细胞的早期凋亡;在顺铂(16 μmol/L)作用24 h后,免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白caspase-3、Bcl-2和Bax的表达水平.结果 与I-10细胞和Tcam-2细胞相比,I-10/DDP细胞(P<0.001)和Tcam-2/DDP细胞(P<0.01)中Panx-2的表达显著增加;干扰Panx-2基因后,免疫印迹结果显示,与NC组相比,shRNA1和shRNA2组中Panx-2的表达量下降(P<0.05);MTT法显示shRNA1和shRNA2组细胞的存活率均低于NC组(P<0.001);在含顺铂培养基的培养下,集落克隆法显示shRNA1和shRNA2组细胞的集落形成能力低于NC组(P<0.001);AnnexinV/PI双染法显示shRNA1和shRNA2组的早期凋亡率(P<0.01)均低于NC组;免疫印迹结果显示,与NC组相比,shRNA1和shRNA2组中凋亡相关蛋白caspase-3表达升高(P<0.05),Bcl-2表达降低(P<0.01),Bax表达升高(P<0.05).结论 下调Pannexin2通道能增强顺铂诱导睾丸癌(I-10)细胞凋亡.
关键词:顺铂睾丸癌Pannexin2凋亡
资助基金:安徽优秀青年人才支持计划重点项目(gxyqZD2016158)蚌埠医学院研究生科研创新计划(Byycx1924)创新训练项目(201910367011)
论文发表日期:2020-08-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:7( 1090-1096 )
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