miR-200c-3p靶向CCNE2抑制肾母细胞瘤细胞增殖
曹娟1
孙丽萍2
安建红2
张欢3
何潇潇3
申洪2
1.深圳市儿童医院病理科,广东 深圳 518038;南方医科大学基础医学院病理学系,广东 广州 5105152.南方医科大学基础医学院病理学系,广东 广州 5105153.深圳市儿童医院病理科,广东 深圳 518038
摘要：目的 预测和验证miR-200c-3p的靶基因并探讨其对肾母细胞瘤增殖的抑制作用.方法 应用生物信息学软件对miR-200c-3p在肾母细胞瘤中的靶基因进行预测,建立SK-NEP-1及G401的miR-200c-3p过表达及抑制表达的稳定细胞系.实验设未转染组(Blank)、模拟物阴性对照组(mimic NC)、miR-200c-3p模拟物组(miR-200c-3p mimic)、抑制剂阴性对照组(inhibitor NC)及miR-200c-3p抑制剂组(miR-200c-3p inhibitor).采用RT-PCR及Western blot方法检测CCNE2在SK-NEP-1及G401不同组中的表达水平,荧光素酶报告基因检测miR-200c-3p和CCNE2的靶向关系,细胞计数盒(CCK-8)和软琼脂克隆形成实验检测miR-200c-3p对SK-NEP-1及G401细胞增殖的抑制作用.结果 生物信息学方法预测CCNE2为miR-200c-3p的靶基因之一.RT-PCR实验结果示肾母细胞瘤细胞中miR-200c-3p模拟物组的CCNE2的表达水平低于模拟物阴性对照组(P<0.05);荧光素酶报告基因检测证实CCNE2是miR-200c-3p的靶基因(P<0.01).Western blot示在肾母细胞瘤细胞中miR-200c-3p模拟物组的CCNE2蛋白的表达水平低于模拟物阴性对照组(P<0.05);CCK-8和软琼脂克隆形成实验证实miR-200c-3p对肾母细胞瘤细胞的增殖能力有明显抑制作用(P<0.01);而miR-200c-3p抑制剂组结果相反.结论 miR-200c-3p通过靶基因CCNE2抑制肾母细胞瘤细胞的增殖.
关键词：miR-200c-3pCCNE2肾母细胞瘤
资助基金：深圳市科创委基础研究项目(JCYJ20160429175432818)
论文发表日期：2020-09-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1246-1252 )
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