紫草素通过抑制人睾丸癌I-10和精原细胞瘤TCAM-2糖酵解诱导细胞死亡
姚越
张冲
韩兵
汤玉锐
熊言骏
汪盛
摘要：目的 探究紫草素对睾丸癌细胞I-10和精原细胞瘤TCAM-2死亡形式的影响,并从线粒体功能和糖酵解方面探讨其可能机制.方法 I-10细胞组加入浓度分别为0μmol/L(对照组)、1.2、1.4、1.6μmol/L的紫草素,TCAM-2细胞组加入浓度分别为0μmol/L(对照组)、0.5、1、1.5μmol/L的紫草素,JC-1试剂盒和ROS试剂盒分别用来检测线粒体膜电位和活性氧的变化;乳酸试剂盒检测胞内乳酸变化;MTT法检测细胞增殖抑制;透射电镜观察细胞死亡形式;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;Western blot法检测线粒体通路相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3和自噬相关蛋白LC3B以及糖酵解相关蛋白PKM2、GLUT1、HK2的相对表达水平.结果 MTT结果表明,紫草素能够随时间和剂量依赖性的抑制I-10和TCAM-2细胞的增殖(P<0.05),I-10组24、48、72 h的IC50值分别为1.8、1.36和1.16μmol/L,TCAM-2组24、48、72 h的IC50值分别为2.37、0.8和0.41μmol/L;紫草素能通过下调I-10和TCAM-2细胞线粒体膜电位和增加细胞活性氧水平而影响其线粒体功能(P<0.05),抑制乳酸水平影响细胞糖酵解能力(P<0.05);透射电镜和Annexin V-FITC/PI双染法检测出紫草素能够诱导I-10和TCAM-2细胞凋亡和过度自噬现象(P<0.05);Western blot证明,紫草素可以通过下调线粒体通路相关凋亡蛋白Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3的表达而影响I-10和TCAM-2细胞线粒体功能,下调PKM2、GLUT1、HK2影响其糖酵功能,通过上调LC3B增加细胞自噬(P<0.05).结论 紫草素对睾丸癌细胞I-10和TCAM-2具有增殖抑制及诱导凋亡和增加自噬作用,其机制可能为紫草素影响I-10和TCAM-2细胞能量代谢功能.
关键词：睾丸癌精原细胞瘤紫草素糖酵解死亡形式
论文发表日期：2020-09-20
页数：7( 1288-1294 )
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