人脐带间充质干细胞经添加B27的无血清培养基诱导后分化成神经元样细胞
李云逸1
杨锦培1
傅国1
周攀1
刘阳1
李志忠2
焦根龙1
1.暨南大学附属第一医院,广东 广州 5106322.暨南大学附属深河医院,广东 河源 517000
摘要:目的 评价人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)经添加B27的无血清培养基诱导后向神经元样细胞分化的能力和效率.方法 将第4代HUCMSCs分为4组:A组:血清培养基(SCM)处理14 d;B组:给予SCM+20 ng/mL神经生长因子(NGF)+10 ng/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)治疗14 d;C组:无血清培养基(SFM)处理14 d;D组:SFM+20 ng/mL NGF+10 ng/mL bFGF处理.每3 d更换各组细胞培养液.倒置显微镜观察神经球生长情况,流式细胞术分析细胞标记物.巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、人重肽神经丝蛋白(NEFH)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)通过qRT-PCR和Western blotting进行定量.结果 在诱导前,HUCMSCs表现出丰富的间充质干细胞表面标志物(CD29、CD44和CD105分别为99.5%、49.6%和77.7%)的表达.在第7、10、14天观察神经元样细胞的形成,D组最优,其次是C、B、A组.qRT-PCR和Western blotting结果显示,A、B、C、D组Nestin和GFAP表达逐渐减少,NEFH和NSE表达逐渐增加,A组与其他3组的GFAP、NEFH、Nestin和NSE表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 添加B27的SFM可以有效地将HUMSCs分化为神经元样细胞,添加细胞因子(NGF和bFGF)使分化效果更显著.
关键词:人脐带间充质干细胞神经元分化无血清培养基
资助基金:广东省医学科学技术研究项目(A2017475)中央高校基本科研业务费专项(21619419)
论文发表日期:2020-09-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:6( 1340-1345 )
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