miR-133b靶向YES1抑制心肌缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡和活性氧簇的积累
彭兴1
林玲1
周祥群1
杨大英1
曹阳2
尹涛源1
刘媛媛3
1.三亚中心医院心血管内科,海南 三亚 5720002.哈尔滨医科大学第一附属医院心血管内科,黑龙江 哈尔滨1500003.黑龙江省医院心内科,黑龙江 哈尔滨 150000
摘要：目的 探究miR-133b对心肌缺血再灌注(I/R)诱导心肌细胞凋亡的作用及机制.方法 体内实验,将大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、转染腺病毒对照组、转染miR-133b腺病毒组,每组9只.在左心室心肌的6个随机点注射转染复合物后,利用左侧冠状动脉前降支打活结方法诱导心肌I/R.通过RT-qPCR检测miR-133b的表达水平,FDP-1 HRV和BRS分析系统测定心功能,酶联免疫吸附法测定血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白I(CTnI)水平,HE染色观察心肌损伤,流式细胞术检测细胞凋亡,2,7-二氯荧光素双乙酸酯(DCFH-DA)探针测定ROS含量.体外实验,心肌H9C2细胞经缺氧/复氧(H/R)处理后,转染miR-NC或miR-133b mimic,RT-qPCR检测miR-133b的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针测定ROS含量;双荧光素酶报告实验验证靶向关系;转染pc-YES1或miR-133b mimic后,Western blot检测YES1的表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针测定ROS含量.结果 与I/R组相比,AdmiR-133b组大鼠心肌中miR-133b的表达显著上调,LVEDP、cTnI和CK-MB水平显著降低,LVSP、+dp/dt、-dp/dt、HR和CF水平显著升高,病理损伤显著减轻,心肌细胞凋亡和ROS积累显著减少(P＜0.01).与H/R组相比,miR-133b mimic组H9C2细胞的miR-133b表达显著上调,细胞凋亡和ROS积累显著减少(P＜0.01).miR-133b与YES1在3'UTR区存在靶向结合位点,共转染YES1 WT和miR-133b mimic可以显著降低荧光素酶活性(P＜0.01).miR-133b mimic组与H/R组相比H9C2细胞中YES1蛋白的表达显著下调(P＜0.01).共转染pc-YES1逆转miR-133b过表达对心肌细胞凋亡和ROS积累的作用.结论 无论是在体内还是体外,miR-133b靶向YES1抑制I/R引起的心肌细胞凋亡和ROS的积累,从而减轻心肌I/R损伤.
关键词：心肌缺血再灌注miR-133bYES1细胞凋亡活性氧
资助基金：黑龙江省卫生计生委科研项目(2016-540)
论文发表日期：2020-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1390-1398 )
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