miR-600通过抑制HIF-1α信号通路降低宫颈癌细胞的增殖能力
周晓霞1
邓洁2
张维3
王嘉佳4
1.成都市第二人民医院妇产科,四川 成都 6100002.成都医学院附属第一医院 妇产科,四川 成都6100003.成都医学院附属第一医院 呼吸内科,四川 成都6100004.重庆医科大学附属第二医院风湿免疫科,重庆 400010
摘要：目的 探讨miR-600是否可通过HIF-1α信号通路调控宫颈癌HeLa细胞的增殖及对Cyclin D1和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响.方法 采用miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α转染HeLa细胞增加和诱导miR-600和HIF-1α的表达.qPCR和Western blot检测转染6 h后Plasmid-HIF-1α对于HeLa细胞HIF-1α表达的影响.将HeLa细胞分为空白对照组(无特殊处理)、miR-600 mimic组(转染miR-600拟似物miR-600 mimic)、Plasmid-HIF-1α组(P-HIF-1α组,转染Plasmid-HIF-1α)和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组(miR-600 mimic+P-HIF-1α组,同时转染miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α).在转染6 h后,使用MTT法检测细胞活性,采用qPCR和Western blot测定VEGF、Cyclin D1和HIF-1αmRNA和蛋白的表达水平.结果 在转染6 h后,miR-600 mimic和Plasmid-HIF-1α对HeLa细胞活性无显著影响(P均<0.05).但转染Plasmid-HIF-1α6 h后,细胞HIF-1α表达水平显著增加.在转染24 h和48 h,与对照组相比较,miR-600 mimic组细胞活性呈时间依赖性下降,Plasmid-HIF-1α组和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组细胞活性呈时间依赖性增加,且Plasmid-HIF-1α组较miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组细胞活性时间依赖性增加更加显著(P均<0.05).转染6 h后,与对照组相比较,miR-600 mimic组VEGF、Cyclin D1和HIF-1α表达均明显下降,Plasmid-HIF-1α组和miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组VEGF、Cyclin D1和HIF-1α表达均明显增加,且Plasmid-HIF-1α组较miR-600 mimic+Plasmid-HIF-1α组增加更明显(P均<0.05).结论 在HeLa细胞中miR-600可以通过抑制HIF-1α信号通路下调Cyclin D1和VEGF的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和分化.
关键词：HeLa细胞miR-600HIF-1α细胞增殖血管内皮生长因子
资助基金：国家自然科学基金(81600388)
论文发表日期：2021-02-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 210-215 )
英文信息