siRNA干扰CTHRC1可体外抑制甲状腺乳头状癌TPC-1细胞的增殖并诱导凋亡
唐振宁
丁小云
秦少杰
张朝林
宁夏医科大学总医院肿瘤外三科,宁夏 银川 750004
摘要：目的 探讨胶原三股螺旋重复蛋白1(CTHRC1)甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、凋亡的影响.方法 成功筛选干扰甲状腺乳头状癌TPC-1细胞CTHRC1表达的siRNA,以脂质体转染法将siRNA转染甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,采用real-time PCR和Western blot检测转染后TCP-1细胞中CTHRC1mRNA和蛋白表达的变化.实验分组:将筛选的干扰序列转染TPC-1细胞作为干扰组(si-CTHRC1组),将随机阴性对照序列转染的TPC-1细胞作为阴性对照组(si-NC组),以不做任何处理TPC-1细胞为空白组(WT组).采用CCK-8实验检测细胞增殖;流式细胞术AV/PI双染观察各组TCP-1细胞凋亡的变化;采用Western blot法检测各组TPC-1细胞中含剪切型半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(c-Caspase-3)蛋白、剪切型多聚ADP核糖聚合酶1(c-PARP1)蛋白表达水平以及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)表达水平.结果 将筛选出明显抑制TPC-1细胞CTHCR1表达的siRNA转染细胞后,TPC-1细胞中CTHRC1的mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05).与WT组和si-NC组相比,si-CTHRC1组的细胞活降低(P<0.05);与对照组相比,si-CTHRC1组的TPC-1细胞细胞凋亡率升高,Western blot实验发现:si-CTHRC1组的c-caspase-3、c-PARP1蛋白表达水平均升高(P<0.05);si-CTHRC1组ERK1/2蛋白的磷酸化水平增加.结论 干扰CTHRC1能够抑制TPC-1细胞的增殖并诱导凋亡,此过程可能通过激活ERK1/2信号通路介导.
关键词：甲状腺癌CTHRC1增殖凋亡siRNA干扰
资助基金：国家自然科学基金(81360390)宁夏回族自治区自然科学基金(NZ13161)宁夏回族自治区自然科学基金(2019AAC03198)宁夏医科大学科学研究基金资助重点项目(XZ2015029)
论文发表日期：2021-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 549-554 )
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