猪诱导多能干细胞可定向分化为前脑GABA能神经元前体
朱缓1
孙婷婷2
王圆圆2
王铁2
马彩云2
王春景2
刘长青2
郭俣1
1.蚌埠医学院检验医学院,安徽 蚌埠 2330002.蚌埠医学院生命科学学院,安徽 蚌埠 233000
摘要：目的 探讨猪诱导多能干细胞(iPSCs)体外定向分化为GABA能神经元前体的方法体系.方法 猪iPSCs诱导分化为GABA能神经元前体遵循两个阶段,第1阶段,猪iPSCs悬浮培养,第3天时形成类胚体,采用神经诱导培养基NIM(SB431542、DMH1、FGF2)继续诱导,第12天分化为原始神经上皮细胞.第2阶段,使用含Pur、B27的NIM培养基悬浮培养形成神经球,至第21天时形成GABA能神经元前体.CM-DiI标记后,定向移植帕金森(PD)模型大鼠黑质纹状体,检测其在宿主脑内存活、迁移及分化状况.结果 猪iPSCs在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性标记OCT4、Nanog、SSEA1和TRA-160,并且核型分析显示没有其他物种来源细胞污染.第12天经诱导分化获得原始神经上皮细胞能够形成玫瑰花环结构,并表达其表面标记物(PAX6、SOX2和Nestin)与神经微管蛋白标志物Tuj1.第21天诱导细胞高表达GABA能神经元前体的表面特异性抗原NKX2.1和前脑标志物FOXG1.移植8周后,体内可分化为GABA能神经元与多巴胺能神经元,明显改善PD大鼠运动行为.结论 结合无血清培养基筛选法逐步定向诱导猪iPSCs高效分化为前脑GABA能神经元前体,移植后能够显著改善PD大鼠的运动功能障碍,为诱导GABA能神经元前体移植治疗神经损伤疾病奠定基础.
关键词：诱导多能干细胞猪细胞分化原始神经上皮细胞GABA能神经元前体帕金森模型大鼠
资助基金：国家自然科学基金(81771381)安徽省自然科学基金(1908085MH277)安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2017A215)安徽省高等学校自然科学研究重点项目(KJ2019A0322)国家级大学生创新创业训练计划项目(201910367005)国家级大学生创新创业训练计划项目(201910367039)国家级大学生创新创业训练计划项目(201910367046)国家级大学生创新创业训练计划项目(202010367015)
论文发表日期：2021-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 820-827 )
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