三硫二苄基抑制头颈部鳞状癌细胞HN30的增殖并诱导其凋亡
徐璐
钱峰
孙磊
上海交通大学药学院细胞与治疗抗体工程研究中心,上海 200240
摘要：目的 探究三硫二苄基(DTS)抑制头颈癌细胞HN30增殖和促进其凋亡的作用机制.方法 通过克隆形成实验检测DTS对不同头颈癌细胞HN30、HN12、SCC25增殖能力的影响,并用MTT实验检测不同浓度DTS对HN30细胞活力的影响;DTS(3、10、30μmol/L)刺激HN30细胞24 h,经AnnexinⅤ-FITC/PI双染及JC-1荧光探针染色,采用流式细胞仪检测DTS对HN30细胞凋亡及线粒体膜电位的影响,并通过免疫印迹实验检测不同浓度DTS作用对凋亡相关蛋白caspase 3、cleaved caspase-3和Bcl-2表达的影响;通过免疫印迹实验检测HN30细胞在DTS(10μmol/L)不同作用时间(0、0.5、1、2、4、8、16 h)下,Akt/p53磷酸化水平的变化.结果 克隆形成实验发现1μmol/L DTS能够明显抑制头颈癌细胞HN30、HN12及SCC25的增殖.MTT实验发现,与溶剂对照组相比,HN30细胞的细胞活力在DTS作用下呈剂量依赖性降低,在100μmol/L DTS作用时效果显著(P<0.001).采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染及JC-1荧光探针染色后,流式细胞术检测发现随着DTS作用浓度增高,HN30细胞的凋亡细胞比例逐渐增高(30μmol/L DTS作用下,P<0.01),线粒体膜电位逐渐降低(30μmol/L DTS作用下,P<0.001).与溶剂对照组相比,DTS刺激24 h后,HN30细胞中cleaved caspase-3的表达升高(30μmol/L DTS作用下,P<0.01),Bcl-2的表达降低(30μmol/L DTS作用下,P<0.001).与溶剂对照组相比,10μmol/L DTS刺激HN30细胞16 h后,Akt磷酸化水平被显著抑制(P<0.001),而p53的磷酸化水平升高(P<0.01).结论 DTS抑制HN30细胞的增殖,并诱导凋亡,其作用机制可能与Akt/p53信号通路有关.
关键词：三硫二苄基头颈部鳞状癌细胞Aktp53
资助基金：国家自然科学基金(81973329)国家自然科学基金(82073858)国家自然科学基金(81773741)科技部精准医学研究重点专项(2017YFC0908500)上海交通大学科技创新专项(19X160010005)
论文发表日期：2021-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 847-853 )
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