Exendin-4通过促进自噬减少非酒精性脂肪性肝病细胞模型的脂质沉积
林楚曼1
方俊博2
向倩如2
周蕊3
杨力2
1.南方医科大学珠江医院内分泌科,广东广州 510280;南方医科大学南方医院神经内科,广东 广州 5105152.南方医科大学珠江医院内分泌科,广东广州 5102803.南方医科大学基础医学院病理学系,广东 广州 510515
摘要：目的 探究Exendin-4改善肝细胞脂质沉积的作用机制,讨论Exendin-4治疗非酒精性脂肪肝病的可能机制.方法 对照组(人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2,不做任何处理);棕榈酸钠(PA)组(LO2与HepG2分别进行PA处理,以构建肝细胞脂肪变性模型);PA+Exendin-4组(LO2与HepG2分别进行PA与Exendin-4共处理);PA+Exendin-4+3BDO组(LO2与HepG2分别进行Exendin-4与3BDO共处理).通过油红O染色实验、CCK8实验,检测对照组、PA组、PA+Exendin-4组的脂质沉积程度与细胞增殖能力,并通过Western blot检测信号通路关键分子p-mTOR、m-TOR、p-AKT、AKT,以及自噬相关蛋白LC3-I/II和p62的表达;通过Western blot与免疫荧光实验,检测LO2与HepG2细胞中GLP-1R表达情况;通过Western blot,检测对照组、PA+Exendin-4组、PA+Exendin-4+3BDO组中LC3-I/II和p62的表达.结果 油红O染色实验表明,PA诱导后细胞中脂质明显增加,PA+Exendin-4组脂质沉积程度较PA组降低;细胞增殖实验表明,PA组细胞增殖水平较对照组明显受抑制(P<0.01);PA+Exendin-4组细胞增殖水平较PA组升高(P<0.05);免疫荧光实验表明,人正常肝细胞LO2和肝癌细胞HepG2细胞株中均有GLP-1R表达;Western blot表明,PA+Exendin-4组p-mTOR的表达较PA组下调,p-AKT的表达较PA组上调.Exendin-4可下调自噬相关蛋白p62,而上调LC3-II的表达,而这一结果可被3BDO逆转.结论 Exendin-4可能通过直接作用于细胞上GLP-1R,激活AKT-mTOR信号通路,进而促进自噬;同时,Exendin-4有助于缓解PA作用下肝细胞的脂质沉积过程,并促进细胞增殖.提示Exendin-4在PA作用下肝细胞的脂质沉积过程中具有重要作用.
关键词：胰高血糖素样肽-1非酒精性脂肪性肝病自噬AKT-mTOR信号通路
资助基金：国家自然科学基金(81270966)广东省自然科学基金(2014A030310036)广东省自然科学基金(2018A030313609)广东省自然科学基金(2017A030313519)南方医科大学临床研究育苗项目(LC2016YM007)国家级大学生创新创业训练计划项目(S201912121056)
论文发表日期：2021-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 1073-1078 )
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