活化的Mir-30a-wnt/β-catenin信号轴通过上调组织蛋白酶K的表达促进牙周膜干细胞向成牙骨质细胞分化
刘芬1
周志斐2
薛洋3
朱斌2
吴补领4
陈发明5
1.西北妇女儿童医院口腔科,陕西 西安 710000;第四军医大学口腔医院牙周病科,陕西 西安710000;南方医科大学深圳医院颌面外科,广东 深圳 5180002.西藏军区总医院口腔科,西藏 拉萨 8500003.第四军医大学口腔医院颌面外科,陕西 西安7100004.南方医科大学深圳口腔医院(坪山),广东 深圳 5180005.第四军医大学口腔医院牙周病科,陕西 西安710000
摘要：目的 探讨牙周膜干细胞(PDLSC)成牙骨质向分化过程中mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控组织蛋白酶K(CTSK)表达的功能作用.方法 极限稀释法分离培养PDLSC,釉基质蛋白衍生物(EMD)诱导细胞成牙骨质向分化.在细胞分化过程中,通过microRNA芯片筛选差异表达的microRNA.首先,给予不同分组细胞EMD诱导和/或抑制microRNA表达等处理,无干预组细胞作为对照.利用qPCR和Western blot技术首先验证差异表达的microRNA是否能够调控CTSK的表达.之后,将细胞膜片复合陶瓷支架材料植入裸鼠皮下,利用免疫组织化学方法观察成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1的表达变化,明确受microRNA调控的CTSK表达变化是否参与了PDLSC成牙骨质分化.在此基础上,从蛋白学水平观察wnt信号通路在microRNA调节CTSK表达过程中是否发挥了相应功效.结果 EMD诱导PDLSC成牙骨质向分化过程中,多种microRNA表达发生变化,其中miR-30a表达出现特异性上调(P<0.05).表达上调的miR-30a进一步调节CTSK的表达(P<0.05),促进PDLSC异位形成类牙骨质样结构,高表达成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1.抑制wnt/β-catenin信号通路,miR-30a对CTSK的表达调控作用出现相应减弱.结论 EMD可能通过上调miR-30a的表达激活wnt/β-catenin信号通路从而经mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控CTSK诱导PDLSC向成牙骨质细胞方向分化.
关键词：牙周膜干细胞组织蛋白酶K成牙骨质向分化微小RNAwnt信号通路
资助基金：国家自然科学基金(81530050)国家自然科学基金(2020SF-047)陕西省青年科技新星项目(2021KJXX-24)西藏自治区重点研发计划项目(XZ202001ZY0059G)
论文发表日期：2021-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1439-1447 )
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