Mage-D1与活化后的p75神经营养因子受体结合可正向调节大鼠外胚间充质干细胞的矿化
罗玉婷1
杨正艳2
李蒙1
赵曼竹3
温秀杰4
周智2
1.重庆医科大学附属口腔医院,重庆 401147;口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,重庆 401147;重庆市高校市级口腔生物医学工程重点实验室,重庆 4011472.重庆医科大学附属口腔医院,重庆 4011473.口腔疾病与生物医学重庆市重点实验室,重庆 4011474.四川省泸州市西南医科大学附属口腔医院正畸科,四川泸州 646000
摘要：目的 检测Mage-D1与活化后p75NTR的结合及对外胚间充质干细胞(EMSCs)矿化的调控.方法 取孕19.5 d SD大鼠牙胚,组织贴壁法获取EMSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原.设置实验分组:空白对照组(NC),100 ng/mL NGF刺激组(100 ng/mL NGF)、慢病毒干扰Mage-D1组(SH-Mage-D1).邻位连接技术检测Mage-D1与经NGF活化后p75NTR结合的变化,并比较不同分组间的结合强度差异.茜素红与ALP染色观察染色,RT-PCR与Western blot检测ALP、Runx2、OCN、BSP、OPN、Col1、Msx1及Dlx1的表达水平.结果 组织块贴壁法获得孕19.5 dEMSCs,流式细胞术检测细胞表面抗原结果为CD44、CD90、CD29、CD146,CD105高表达,CD45低表达;邻位连接法检测Mage-D1与经NGF活化后p75NTR的结合随着时间的延长而增多,且实验组与对照组相比结合强度差异具有统计学意义(P<0.05);茜素红与ALP染色结果显示矿化结节与碱性磷酸酶与强度变化一致;RT-PCR与Western blot检测ALP、Runx2、OCN、BSP、OPN、Col1、Msx1及Dlx1在100 ng/mL NGF组最高(P<0.05).结论 Mage-D1在外胚层间充质细胞中可与经NGF活化后的p75NTR直接结合,且二者的结合对EMSCs的矿化有正向调节作用.
关键词：p75NTRMage-D1外胚间充质干细胞成骨分化
资助基金：国家自然科学基金(82000997)重庆市自然科学基金(cstc2019jcyj-msxmX0191)重庆市自然科学基金(cstc2020jcyj-msxmX0018)重庆市卫生委员会科学(2021MSXM31)创新团队建设项目(CXTDG201602006)
论文发表日期：2021-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1547-1553 )
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