活性氧与铁死亡通路相互作用在丙酮醛引起的小鼠胚胎成骨细胞损伤中起重要作用
冯苑仪1
羊冬梅1
智喜梅2
邓海鸥2
张伟杰2
王瑞雪2
吴文2
1.南方医科大学第二临床医学院,广东 广州 510515;广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省老年医学研究所东病区内分泌科,广东 广州 5100802.广东省人民医院//广东省医学科学院//广东省老年医学研究所东病区内分泌科,广东 广州 510080
摘要:目的 探讨活性氧和铁死亡在丙酮醛诱导小鼠胚胎成骨细胞(MC3T3-E1)损伤中是否存在相互作用.方法 应用丙酮醛损伤MC3T3-E1细胞建立模拟糖尿病骨质损伤的细胞模型.应用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)测定MC3T3-E1细胞的存活率;罗丹明123染色荧光显微镜照相法测定线粒体膜电位;双氯荧光素(DCFH-DA)荧光显微镜照相法检测胞内活性氧水平;碱性磷酸酶试剂盒检测定碱性磷酸酶活性;茜素红染色观察成骨细胞晚期标志物-矿化结节的形成;铁离子试剂盒检测铁离子水平;Western blot检测成骨细胞的抑制铁死亡的标志蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达水平.结果 0.6 mmol/L丙酮醛处理MC3T3-E1细胞24 h可明显减少GPX4的表达(P<0.001),同时可使胞内铁离子浓度升高,细胞存活率降低,线粒体膜电位丢失,胞内活性氧水平升高,碱性磷酸酶活性降低和矿化结节减少(P<0.001).应用2 mmol/L活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸和丙酮醛共处理MC3T3-E1细胞24 h可增加GPX4的表达(P<0.01),应用4μmol/L铁死亡抑制剂铁抑素-1与丙酮醛共处理成骨细胞24 h可使胞内活性氧水平降低(P<0.001);应用N-乙酰半胱氨酸或铁抑素-1与丙酮醛共处理成骨细胞24 h均能对抗丙酮醛引起的上述其他细胞损伤(P<0.001).结论 活性氧与铁死亡通路相互作用在丙酮醛引起MC3T3-E1成骨细胞损伤中起重要的作用.
关键词:活性氧铁死亡丙酮醛成骨细胞糖尿病合并骨质疏松症
资助基金:广东省自然科学基金(2015A030313872)计划生育科技项目(20181A011114)
论文发表日期:2022-01-20
在线出版日期:2025-08-15(本平台首次上网日期,不代表文献的发表时间)
页数:8( 108-115 )
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