PI3K/AKT/mTOR信号通路异常激活导致强直性脊柱炎患者的间充质干细胞自噬减弱
刘振华1
闵少雄2
卢秀仪3
岑水忠1
陈志鹏4
王涛1
李建君1
曾炜波1
邱素均1
1.南方医科大学珠江医院脊柱外科,广东 广州 5102822.北京大学深圳医院脊柱外科,广东 深圳 5180343.广州医科大学附属第四医院皮肤科,广东 广州 5103164.中山大学孙逸仙纪念医院骨外科,广东 广州 510120
摘要：目的 比较强直性脊柱炎患者间充质干细胞(ASMSCs)与健康人间充质干细胞(HDMSCs)自噬水平的差异及其机制.方法 将ASMSCs和HDMSCs种于6孔板,细胞贴壁后,实验组加入25 ng/mLα-肿瘤坏死因子(TNF-α)及培养液,对照组单纯加入培养液,诱导6 h后进行后续实验.用GFP-LC3B免疫荧光染色检测自噬情况,并通过检测LC3Ⅱ/LC3 I及P62的蛋白表达进一步确认.通过qRT-PCR检测基因表达水平,通过Western blot检测蛋白表达水平.使用TG100713特异性阻断PI3K的磷酸化以明确PI3K/AKT/mTOR通路与ASMSCs自噬减弱的关系.结果 ASMSCs的LC3Ⅱ/LC3 I表达水平和GFP-LC3B免疫荧光斑点明显弱于HDMSCs(P<0.05),而P62表达水平明显高于HDMSCs(P<0.05).在自噬过程中,ASMSCs中p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的表达明显高于HDMSCs(P<0.05).阻断PI3K磷酸化后,p-AKT/AKT和p-mTOR/mTOR的表达及ASMSCs的自噬可恢复至HDMSCs的水平.结论 TNF-α诱导下,PI3K/AKT/mTOR信号通路异常是导致ASMSCs自噬减弱的关键,可能参与AS慢性炎症的发生.
关键词：强直性脊柱炎间充质干细胞肿瘤坏死因子-α自噬
资助基金：广东省自然科学基金(2018A0303130258)
论文发表日期：2022-02-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：6( 272-277 )
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