小鼠非酒精性脂肪性肝炎早期YAP活性变化特征及其与胆管反应的时空关系
刘雅雪
梁嘉恩
曾伟兰
汪艳
南方医科大学中心实验室,南方医科大学药学院,广东 广州 510515
摘要：目的 探究非酒精性脂肪性肝炎(NASH)早期Yes-相关蛋白(YAP)活性变化特点及其与胆管反应(DR)发生的时空关系.方法 通过蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饮食、硫代乙酰胺(TAA)饮食喂养雄性C57BL/6J小鼠12周,构建NASH小鼠模型.通过HE、Masson染色评估肝脏病理学改变,qPCR技术检测YAP及其靶基因(Ctgf、Cyr61、Acta2)的mRNA表达情况;免疫印记检测YAP的总蛋白表达水平;免疫组化检测YAP、DR标志(K19和Sox9)表达与分布情况.结果 在MCD饮食诱导的NASH疾病早期(1～4周),肝组织YAP及其靶基因Ctgf、Cyr6、Acta2的mRNA表达量和YAP总蛋白表达量均增加(P<0.01).YAP阳性肝细胞数量在第2周达到峰值90.8/×400视野后,第4周减少至30.8/×400视野(P<0.001),并在汇管区附近(即DR发生初始位置)观察到YAP阳性胆管样细胞.8～12周时可在中央静脉周围肝小叶中观察到大量的K19/Sox9阳性DR细胞(P<0.01),同时肝组织中仅有少量YAP阳性肝细胞(P>0.05),且YAP阳性胆管样细胞数量逐渐增加(P<0.001).在TAA饮食诱导的NASH疾病早期(3 d～2周),肝组织YAP及其靶基因Ctgf、Cyr6、Acta2的mRNA表达量和YAP总蛋白表达量均增加(P<0.05).YAP阳性肝细胞数量在2周达到峰值69.2/×400视野;4周减少至55.2/×400视野(P<0.001),并且在中央静脉附近(即DR发生初始位置)观察到YAP阳性胆管样细胞.6～12周时可在中央静脉周围肝小叶中观察到大量的K19/Sox9阳性DR细胞(P<0.01),同时YAP阳性肝细胞数量持续减少(P<0.001),YAP阳性胆管样细胞数量持续增加(P<0.001).结论 NASH损伤肝脏组织中,YAP激活早于DR发生,YAP活性变化特点及其分布与DR发生分布具有时空相关关系,同时肝细胞内的YAP激活似乎可以诱导肝细胞转分化为胆管样细胞,参与DR发生.
关键词：YAP非酒精性脂肪性肝炎胆管反应时空关系
资助基金：国家自然科学基金(82070589)国家自然科学基金(81670522)南方医科大学南方医院院长基金(2018Z016)深圳市三名工程项目(SZSM201911001)
论文发表日期：2022-09-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 1324-1334 )
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