miR-16-5p通过靶向YWHAQ调控乳腺癌耐药细胞的凋亡与迁移能力
朱海涛1
毛慧兰2
陶爽1
王文锐3
陈昌杰4
杨清玲4
1.蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室,安徽蚌埠233000;蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室,安徽蚌埠2330002.蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室,安徽蚌埠2330003.蚌埠医学院生物技术教研室,安徽蚌埠2330004.蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室,安徽蚌埠233000
摘要：目的 探究miR-16-5p对乳腺癌紫杉醇耐药细胞生物学活性的影响及分子机制.方法 以人乳腺癌亲本细胞(SKBR-3)与乳腺癌紫杉醇耐药细胞(SKBR-3/PR)为研究对象.实验设空白对照组、阴性对照组、miR-16-5p类似物组(miR-16-5p mimics)、miR-16-5p抑制剂组(miR-16-5p inhibitor),YWHAQ干扰组(si-YWHAQ),以及联合组(miR-16-5p mimics+si-YWHAQ).利用qRT-PCR检测乳腺癌组织与癌旁组织、SKBR-3与SKBR-3/PR间miR-16-5p的表达水平.使用生信数据对miR-16-5p的靶基因做预测,双荧光素酶实验验证靶向结合.免疫印迹检测细胞YWHAQ、Bcl-2和Bax表达.CCK-8和Transwell检测细胞增殖迁移能力.流式细胞术检测耐药细胞周期凋亡改变.结果 qRT-PCR显示乳腺癌组织中miR-16-5p水平低于癌旁组织(-1.19±1.90 vs 1.59±1.76,P<0.01).生物信息预测YWHAQ是miR-16-5p的靶基因,荧光素酶实验证实miR-16-5p能够靶向调节YWHAQ(P<0.01).相对于SKBR-3细胞,SKBR-3/PR细胞中miR-16-5p表达水平降低(P<0.01),YWHAQ表达水平增高(P<0.05).Western blot结果显示miR-16-5p类似物能够抑制YWHAQ表达,miR-16-5p抑制剂能够促进YWHAQ表达(P<0.01).相对于对照组,miR-16-5p类似物能够将耐药细胞阻滞在G0/G1期[(55.61±1.99)％vs(43.06±1.53)％,P<0.01],抑制细胞增殖和迁移能力(P<0.01),促进细胞凋亡[(10.37±0.23)％vs(3.81±0.88)％,P<0.01],YWHAQ干扰组细胞迁移能力下降,凋亡率升高,miR-16-5p类似物组与YWHAQ干扰组细胞的Bax蛋白表达增加,YWHAQ与Bcl-2蛋白水平降低.相对于miR-16-5p类似物组,联合组细胞迁移能力被抑制(75.75±29.85 vs 181.11±11.71,P<0.01),凋亡率显著升高[(24.20±2.43)％vs(14.10±4.47)％,P<0.01].结论 miR-16-5p能够通过靶向调节YWHAQ调控Bcl-2/Bax的表达,从而改变乳腺癌紫杉醇耐药细胞的生物学活性.
关键词：乳腺癌耐药miR-16-5pYWHAQ
资助基金：安徽省教育厅自然科学重大项目(KJ2019ZD28)蚌埠医学院面上项目(2020bypd005)蚌埠医学院研究生科研创新计划项目(Byycx21001)
论文发表日期：2022-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 1476-1485 )
英文信息