Fkbp38基因缺失导致小鼠早发性卵巢功能不全:基于激活mTOR通路并诱导细胞凋亡
周玉霞1
赵茴茴1
帅领1
佘加杰2
刁瑞英2
汪丽萍3
1.南方医科大学南方医院妇产科,广东 广州 5105152.深圳市第二人民医院生殖医学科,广东 深圳 5180353.南方医科大学南方医院妇产科,广东 广州 510515;深圳市第二人民医院生殖医学科,广东 深圳 518035
摘要：目的 探讨他克莫司结合蛋白38(Fkbp38)在卵泡发育中的作用及其缺失导致早发性卵巢功能不全(POI)的机制.方法 采用Cre-loxp系统构建卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠,并应用PCR鉴定小鼠基因型,然后在蛋白水平上验证Fkbp38在卵母细胞中的敲除效果.通过HE染色在显微镜下计数敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量分析卵母细胞缺失Fkbp38基因对小鼠卵泡发育的影响.通过繁殖实验及ELISA实验检测小鼠繁殖能力及血清性激素水平,明确卵母细胞敲除Fkbp38基因对卵巢功能的影响.TUNEL法检测敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况.检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路下游靶蛋白磷酸化核糖体S6(PS6)活性验证Fkbp38基因对mTOR信号通路的影响.IF检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及Bcl2-Associated X(BAX)表达明确Fkbp38基因敲除对卵母细胞发育的影响.结果 卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠模型构建成功.敲除小鼠较对照小鼠表现出生育力下降,性激素水平紊乱,卵巢内原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡数均显著减少(P<0.05),引起POI样改变.卵母细胞特异性敲除Fkbp38基因后,mTOR信号通路激活,颗粒细胞凋亡增加,卵母细胞内BAX蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,BAX/Bcl-2蛋白比值显著升高(P<0.05).结论 Fkbp38在卵泡发育中发挥重要作用,其缺失致POI发生的机制可能是通过激活mTOR信号通路诱导细胞凋亡而引起的.
关键词：早发性卵巢功能不全卵母细胞Fkbp38mTOR信号通路细胞凋亡
资助基金：国家自然科学基金(81571389)
论文发表日期：2022-11-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1611-1617 )
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