miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移
谈秋瑜1
吴旭1
纪方2
吴少云3
颜亮1
1.皖南医学院活性生物大分子安徽省重点实验室,安徽 芜湖 2410022.海军军医大学附属长海医院,上海2004333.芜湖医药卫生学校,安徽 芜湖 241000
摘要：目的 探讨miR-125b-5p调控RAB3D在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制.方法 通过qRT-PCR检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达水平.骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化;通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D;通过Western blot检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中RAB3D的表达水平;骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平;并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化;随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化.结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达明显下调(P<0.05).3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因.qRT-PCR、Western blot结果显示,miR-125b-5p表达量升高,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05);miR-125b-5p表达量降低,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05),而RAB3D的mRNA水平没有发生变化.细胞增殖及迁移实验结果显示,miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反,而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量,RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断(P<0.05).结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移.
关键词：miR-125b-5pRAB3D骨肉瘤细胞细胞增殖细胞迁移
资助基金：国家自然科学基金(81872171)安徽省科研编制计划项目(2022AH040179)安徽省高校自然科学重点项目(KJ2021A0852)安徽省高校自然科学重点项目(KJ2021A0856)皖南医学院青年卓越人才项目(Wyqnyx202002)
论文发表日期：2023-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 68-75 )
英文信息