人骨髓间充质干细胞外泌体来源的miR-335-5p促进人牙周膜干细胞的成骨分化:基于下调DKK1表达
刘屿1
曾莲2
王卫红1
杨艳玲2
王洲2
刘建启2
李卫2
孙婧宇2
余晓宏2
1.昆明医科大学附属口腔医院口腔颌面外科,云南 昆明 6501062.云南大学附属医院(云南省第二人民医院、云南省眼科医院)口腔内科,云南 昆明 650021
摘要：目的 探讨人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)外泌体来源的miR-335-5p调控DKK1对人牙周炎中牙周膜干细胞(PDLSCs)成骨分化的影响及其作用机制.方法 提取hBMMSCs外泌体,通过透射电镜、Western blot以及PKH67标记鉴定外泌体,通过TNF-α诱导PDLSCs构建牙周炎细胞模型.提取的外泌体与TNF-α诱导的PDLSCs共同培养.qRT-PCR检测miR-335-5p,促炎因子IL-1β、IL-6、IL-8和成骨标志基因RunX2、OCN、BMP-2 mRNA表达.茜素红和ALP染色检测钙结节,Western blot检测DKK1蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-335-5p与DKK1的靶向关系.结果 提取的hBMMSCs外泌体中CD9和CD81显著表达(P<0.05).hBMMSC外泌体降低TNF-α诱导的hPDLSCs中促炎细胞因子IL-1β(P<0.01)、IL-6(P<0.05)、IL-8(P<0.05)的mRNA表达并促进成骨标志基因RunX2(P<0.01)、OCN(P<0.05)、BMP-2(P<0.001)mRNA和钙结节生成.miR-335-5p在hBMMSCs外泌体中高表达,过表达miR-335-5p靶向下调DKK1(P<0.001),抑制促炎细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8的表达(P<0.001),促进成骨标志物BMP-2、OCN、RunX2的mRNA表达以及钙结节生成(P<0.001).结论 hBMMSC外泌体来源的miR-335-5p靶向下调DKK1,促进hPDLSCs成骨分化,抑制牙周炎的发展进程.
关键词：牙周炎骨髓间充质干细胞外泌体miR-335-5p牙周膜干细胞成骨分化
资助基金：云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目(NO.202001AY070001-254)云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目(NO.202101AY070001-193)云南省创新团队项目(NO.202105AE160004)
论文发表日期：2023-03-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 420-427 )
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