高表达MYH9通过激活AKT/c-Myc通路抑制非小细胞肺癌细胞凋亡
刘芳1
彭岚竹2
席菁乐1
1.南方医科大学南方医院肿瘤科,广东 广州 5105152.南方医科大学中医结合医院肿瘤中心,广东 广州 510315
摘要：目的 探讨肌球蛋白重链9(MYH9)对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞增殖、凋亡和对顺铂敏感性的影响并探讨其作用机制.方法 常规培养6株NSCLC细胞系(A549、H1299、H1975、SPCA1、H322、H460)和1株正常支气管上皮细胞系(16HBE)采用Western blot法检测MYH9的表达情况;采用免疫组织化学染色法检测NSCLC患者组织MYH9的表达,实验分为癌组织(49例)和癌旁组织(43例);常规培养H1299和H1975细胞系,使用CRISPR/Cas9技术构建MYH9敲除的NSCLC细胞系,实验分为sgNC组,sgMYH9组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、克隆形成实验检测敲除MYH9对肺癌细胞增殖的影响;Western blot实验、细胞凋亡流式细胞术检测MYH9对细胞凋亡的影响;通过IC50法检测敲除MYH9的肺癌细胞对顺铂敏感性的影响,实验分为sgNC组、sgMYH9组;培育小鼠肿瘤异种移植物模型验证MYH9体内生物学功能,实验分为sgNC组、sgMYH9组.结果 与癌旁组织相比,MYH9在癌组织中上调(P<0.001),高表达患者具有更短的生存(P=0.023).敲除MYH9抑制细胞增殖(P<0.001),促进细胞凋亡(P<0.05),增加对顺铂的化学敏感性.此外,MYH9的耗竭显著抑制了体内肿瘤生长(P<0.001).分子机制表明,敲除MYH9使AKT/c-Myc轴失活(P<0.05),从而抑制BCL-2样蛋白1的表达(P<0.05),促进BH3相互作用结构域死亡激动蛋白和凋亡调节剂BAX的表达(P<0.05),并激活胱天蛋白酶3和胱天蛋白酶9(P<0.05).结论 MYH9通过AKT/c-Myc轴调节细胞凋亡,从而促进NSCLC进展.
关键词：MYH9CRISPR-Cas9非小细胞肺癌细胞凋亡顺铂耐药Akt/c-Myc信号通路
资助基金：广东省自然科学基金项目(2014A030310450)
论文发表日期：2023-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 527-536 )
英文信息