低HMGB1含量的肿瘤细胞裂解物增强树突状细胞的抗肺癌作用
潘中武1
李思琪2
王耀辉1
刘海军3
桂琳1
董博翰1
1.皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室,安徽 芜湖 2410022.皖南医学院生物化学教研室,安徽 芜湖 2410023.皖南医学院药学院,安徽 芜湖 241002
摘要：目的 探讨低含量高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的肿瘤细胞裂解物(TCL)对树突状细胞抗肺癌作用的影响.方法 反复冻融的方法制备Lewis肺癌细胞TCL.Western blot检测TCL中HMGB1蛋白的表达情况.用30 nmol/L甘草酸(GA)抑制Lewis肺癌细胞中HMGB1的表达,进而制备低含量HMGB1的TCL(LH-TCL).用未处理的Lewis肺癌细胞制备正常含量HMGB1的TCL(NH-TCL).分为不同剂量NH-TCL负载DC组、LH-TCL负载DC组及PBS对照组,用流式细胞术检测体外诱导的小鼠树突状细胞(DC)表面CD11b、CD11c、CD86表达或细胞凋亡,用酶联免疫吸附试验检测DC细胞IL-12分泌情况.分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,用流式细胞术检测小鼠脾细胞表面CD69的表达情况,酶联免疫吸附试验检测小鼠脾细胞TNF-β的分泌.分为NH-TCL刺激DC活化的脾细胞组、LH-TCL刺激DC活化的脾细胞组及PBS对照组,并设5∶1、10∶1、20∶1三个效靶比进行体外杀伤实验,采用CCK8法检测小鼠脾细胞杀伤肿瘤细胞的活性.分为未活化DC组、NH-TCL活化的DC组、LH-TCL活化的DC组及PBS对照组,通过体内抑瘤实验,评估DC过继免疫细胞疗法抑制小鼠皮下移植瘤生长的效果.结果 GA作用后的Lewis肺癌细胞制备的TCL中,HMGB1的含量显著降低(P<0.05).与NH-TCL相比,LH-TCL具有更好的减少DC凋亡的能力(P<0.001),并促进DC表面CD86的表达和IL-12的分泌,而负载LH-TCL的DC也能更好地激活脾淋巴细胞并诱导更强的抗肿瘤免疫作用(P<0.01).在体外,负载LH-TCL的DC激活脾淋巴细胞对Lewis肺癌细胞的杀伤活性显著提高(P<0.01);在实验动物体内,免疫负载LH-TCL的DC可明显抑制肿瘤组织生长(P<0.05).结论 用LH-TCL负载DC,可以增强DC诱导的抗肿瘤免疫作用,提高DC过继免疫细胞治疗的疗效,为该免疫治疗方法的改进提供了一个新的途径.
关键词：肿瘤细胞裂解物小鼠脾细胞肺癌细胞抗肿瘤免疫高迁移率族蛋白B1
资助基金：安徽高校自然科学研究重点项目(KJ2019A0415)安徽高校自然科学研究重点项目(KJ2020A0615)安徽省教育厅高校优秀青年人才项目(gxyqZD2019040)青年卓越人才培养项目(wyqnyx202001)国家级大学生创新创业训练计划项目(202110368054)
论文发表日期：2023-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 906-914 )
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