乳酸诱导PLEKHA4的上调参与胶质瘤细胞增殖和凋亡的生物学进程
叶静静1
徐文琴1
奚邦生2
王能乾3
陈天兵1
1.皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室,安徽 芜湖 241001;皖南医学院弋矶山医院中心实验室,安徽 芜湖 2410012.皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室,安徽 芜湖 241001;皖南医学院弋矶山医院检验科,安徽 芜湖 2410013.皖南医学院重大疾病非编码RNA转化研究安徽普通高校重点实验室,安徽 芜湖 241001;皖南医学院弋矶山医院儿科,安徽 芜湖 241001
摘要：目的 探究乳酸诱导的PLEKHA4基因表达对胶质瘤细胞的生物学功能的影响以及潜在分子机制.方法 通过GEO数据库以及GEPIA2在线网站分析PLEKHA4表达水平与胶质瘤病理分级的关系,通过RNA小干扰技术设计PLEKHA4 siRNA后分别转染胶质瘤U251和T98G细胞处理1d,通过实时细胞分析技术以及Edu实验检测胶质瘤细胞的增殖能力,平板克隆实验检测细胞的克隆形成能力,流式分析技术检测胶质瘤细胞的周期和凋亡;PCR检测临床收集的胶质瘤样本和对照以及乳酸和葡萄糖治疗下胶质瘤细胞中PLEKHA4的mRNA表达量的变化;体内异种移植小鼠实验检测裸鼠成瘤能力;Western blot检测cyclinD1、CDK2、Bcl2、β-catenin表达和MAPK信号通路关键蛋白的磷酸化表达水平.结果 GEO数据库和在线网站分析结果显示PLEKHA4在胶质瘤组织中高表达且与不良预后相关;RTCA以及Edu实验显示,敲降PLEKHA4抑制胶质瘤细胞的增殖(P＜0.05);平板克隆实验显示,敲降组的细胞克隆数目明显低于对照组(P＜0.01);流式细胞术分析结果显示敲低PLEKHA4后细胞周期受到阻滞G1期细胞增加,S期细胞减少,凋亡细胞增加(P＜0.01);胶质瘤样本和乳酸和葡萄糖治疗后胶质瘤细胞的PLEKHA4基因的mRNA表达升高(P＜0.01);敲降PLEKHA4基因后,裸鼠成瘤能力降低;Western blot结果显示敲减PLEKHA4后能够抑制cyclinD1、CDK2、Bcl2等功能蛋白的表达,且显著抑制ERK、p38的磷酸化和β-catenin蛋白表达(P＜0.01).结论 敲减PLEKHA4基因通过抑制MAPK信号通路的活化和β-Catenin的表达,抑制胶质瘤细胞的增殖促进凋亡,同时糖酵解产生的乳酸诱导PLEKHA4表达上调.
关键词：胶质瘤乳酸PLEKHA4增殖凋亡生物学功能
论文发表日期：2023-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 1071-1080 )
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