miR-30e-5p过表达促进结直肠癌细胞的增殖和迁移:基于下调PTEN激活CXCL12轴
魏可1
石纪雯2
肖雨寒1
王文锐3
杨清玲4
陈昌杰4
1.蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233000;蚌埠医学院肿瘤基础研究与临床检验诊断重点实验室,安徽 蚌埠 2330002.蚌埠医学院癌症转化医学安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 2330003.蚌埠医学院生物技术教研室,安徽 蚌埠 2330004.蚌埠医学院生物化学与分子生物学教研室,安徽 蚌埠 233000
摘要：目的 探讨miR-30e-5p通过PTEN/CXCL12轴对结直肠癌生物学活性的影响及机制.方法 实验设置空白对照、阴性对照、miR-30e-5p mimics组、miR-30e-5p inhibitor组及共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN(PTEN过表达)组或miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN(PTEN干扰)组.生物信息学分析miR-30e-5p在结直肠癌组织和正常组织中的表达差异;qRT-PCR检测miR-30e-5p在肠上皮细胞和结直肠癌细胞中的差异表达;生物信息学和双荧光素酶实验预测并验证miR-30e-5p与PTEN的靶向关系;平板克隆、CCK-8增殖、细胞周期、细胞凋亡、划痕愈合和Transwell实验检测癌细胞的生物学活性;Western blotting检测癌细胞PTEN、CXCL12表达情况;小鼠体内实验检测miR-30e-5p(miR-NC、miR-30e-5p inhibitor组)对结直肠癌发生发展的影响.结果 生信分析结直肠癌组织miR-30e-5p较癌旁组织表达升高(P＜0.01);在癌细胞中miR-30e-5p较肠上皮细胞表达升高(P＜0.01);双荧光素酶实验证实miR-30e-5p与PTEN存在靶向关系(P＜0.05);相对于Control组,miR-30e-5p mimics能增强癌细胞增殖、转移能力并抑制凋亡(P＜0.05),共转染miR-30e-5p mimics+LV-PTEN能够逆转miR-30e-5p mimics的作用(P＜0.05);miR-30e-5p mimics能抑制PTEN表达,增强CXCL12表达(P＜0.01);然而miR-30e-5p inhibitor与mimics效果相反,将细胞阻滞在G0/G1期,共转染miR-30e-5p inhibitor+si-PTEN能逆转miR-30e-5p inhibitor的作用(P＜0.05);体内实验发现相对于miR-NC组,miR-30e-5p inhibitor可抑制肿瘤发生发展.结论 miR-30e-5p过表达通过下调PTEN激活CXCL12轴,从而促进结直肠癌细胞的增殖和迁移.
关键词：结直肠癌miR-30e-5pPTENCXCL12
资助基金：安徽省自然科学基金(2108085MH286)蚌埠医学院研究生科研创新计划项目(Byycx22037)
论文发表日期：2023-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：12( 1081-1092 )
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