猪重组NK-lysin抑制肝细胞性肝癌的转移:基于下调FKBP3表达、抑制氧化磷酸化和糖酵解
范艺凡
冯志伟
范阔海
尹伟
孙娜
孙盼盼
孙耀贵
李宏全
山西农业大学动物医学学院,山西 太谷 030801;中兽医药现代化山西省重点实验室,山西 太谷 030801
摘要：目的 应用生物信息学方法探究猪重组NK-lysin(prNK-lysin)抑制肝癌细胞转移潜在的作用靶点和通路.方法 将肝癌细胞设置为空白对照组,PBS处理组和prNK-lysin处理组,37℃作用6h后,应用高效液相色谱串联质谱对肽段进行鉴定,按照Foldchange=1.2倍且P＜0.05筛选出差异表达蛋白.基于GO、KEGG等数据库对差异表达蛋白进行GO功能分析和KEGG通路分析.运用RT-qPCR验证细胞中多肽-N-乙酰半乳糖胺基转移酶13(GALNT13)、跨膜蛋白51(TMEM51)和FKBP脯酰异构酶3(FKBP3)的mRNA相对表达量.Western blot验证FKBP3的蛋白表达量.结果 蛋白组学表明,与空白对照组相比,prNK-lysin处理组中有1989个差异表达蛋白;与PBS处理组相比,prNK-lysin处理组中有2753个差异表达蛋白;PBS处理组和空白对照组相比,有15个差异表达蛋白.相对于PBS处理组和空白对照组,prNK-lysin处理组中共有1909个差异表达蛋白.GO和KEGG分析表明差异表达蛋白主要参与Viral process、translational initiation、RNA binding等过程,主要富集于Ribosome、Protein process in endoplasmic reticulum、RNA transport等通路.RT-qPCR表明,与空白对照组相比,prNK-lysin处理组显著升高了细胞内GALNT13(1.54±0.06vs1.02±0.17,P＜0.05)和TMEM51(1.27±0.07vs1.00±0.04,P＜0.01)的mRNA相对表达量,显著降低了FKBP3(0.43±0.06vs1.02±0.24,P＜0.05)的mRNA相对表达量.Western blotting表明prNK-lysin处理组与空白对照组相比显著降低了细胞内FKBP3(0.68±0.02 vs 1.02±0.03,P＜0.001)的蛋白表达量.结论 prNK-lysin处理后肝癌细胞SMMOL/LC-7721的蛋白质组与空白组相比发生显著变化,prNK-lysin作用于FKBP3蛋白,并能通过影响细胞内氧化磷酸化和糖酵解等通路发挥其抑制作用.
关键词：肝细胞性肝癌蛋白组学猪重组NK-lysin差异表达蛋白
资助基金：中央引导地方科技发展资金项目(2020-2021)
论文发表日期：2023-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 1116-1126 )
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