牙龈卟啉单胞菌感染对食管癌细胞内IFNGR1棕榈酰化位点突变的影响
申刘青1
张顶彧2
高社干2
1.河南科技大学临床医学院//河南科技大学第一附属医院//河南科技大学肿瘤研究所//河南省肿瘤表观遗传重点实验室,河南 洛阳 471003;中国人民解放军联勤保障部队第九八九医院,河南 洛阳 4710032.河南科技大学临床医学院//河南科技大学第一附属医院//河南科技大学肿瘤研究所//河南省肿瘤表观遗传重点实验室,河南 洛阳 471003
摘要：目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染对食管鳞癌细胞(ESCC)内IFNGR1棕榈酰化位点突变的机制及临床意义.方法 Western blot检测Pg感染不同时间(24、48 h)ESCC细胞KYSE30及KYSE70中IFNGR1蛋白量表达水平.2-BP检测IFNGR1的棕榈酰化作用.构建IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A棕榈酰化位点突变位点质粒,建立IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A稳定细胞系,分别用Pg感染IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A细胞,并分为4组:IFNGR1-WT、IFNGR1-C122A、IFNGR1-WT+Pg和IFNGR1-C122A+Pg组.免疫荧光和click-it实验检测IFNGR1在122位点发生棕榈酰化,以及Pg促进IFNGR1在ESCC内发生棕榈酰化.利用平板克隆、划痕实验及Transwell法检测Pg感染前后,IFNGR1-WT和IFNGR1-C122A稳转细胞株的体外增殖、迁移与侵袭能力差异.免疫荧光实验检测IFNGR1与溶酶体标记物LAMP2共定位情况.免疫组化检测50例ESCC组织中Pg感染与IFNGR1蛋白的表达情况;采用卡方检验及R Studio软件分析二者与ESCC患者临床病理特征及生存预后之间的相关性.结果 Pg感染ESCC下调IFNGR1的蛋白表达.IFNGR1在122位点发生棕榈酰化.Pg促进IFNGR1在ESCC内棕榈酰化.与IFNGR1-WT组相比,IFNGR1-WT+Pg组体外增殖253±6.245vs52±2.45、迁移(0.7816±0.0071)%vs(0.4347±0.0366)%及侵袭709.33±14.57vs356.3±17.39能力均显著增强(P＜0.05);与IFNGR1-C122A组相比,IFNGR1-C122A+Pg组细胞体外增殖137.33±4.726vs29.67±3.055、迁移(0.7477±0.0057)%vs(0.2406±0.0028)%及侵袭587.33±5.033vs67.33±2.517能力同样均显著增强(P＜0.05).与IFNGR1-WT+Pg组相比,IFNGR1-C122A+Pg体外增殖137.33±4.726 vs 253±6.245、迁移(0.7477±0.0057)%vs(0.7816±0.0071)%及侵袭587.33±5.033vs709.33±14.57能力均显著降低(P＜0.05).Pg及ZDHHC3促进IFNGR1在溶酶体内降解;IFNGR1与Pg表达呈负性相关,且IFNGR1的表达降低与更差的病理特征及生存预后相关.结论 Pg感染ESCC下调IFNGR1蛋白表达量,同时诱导IFNGR1棕榈酰化,促进ESCC恶性化进展;IFNGR1的棕榈酰化位点突变减少ESCC增殖、迁移和侵袭作用;Pg感染ESCC靶向IFNGR1到溶酶体内降解可能是由于棕榈酰化作用,因此,清除Pg或抑制棕榈酰化作用能有效抑制食管癌的恶性进展.
关键词：食管鳞癌牙龈卟啉单胞菌IFNGR1棕榈酰化增殖迁移侵袭
论文发表日期：2023-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1155-1163 )
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