阿美替尼具有较好的抗神经母细胞瘤作用:基于下调MMP2和MMP9的表达
刘雪柔
杨玉梅
蔡慧
张耀帅
范方田
李娴
李姗姗
蚌埠医学院药学院,安徽省生化药物工程技术研究中心,安徽 蚌埠 233030
摘要：目的 探究表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂阿美替尼对神经母细胞瘤SH-SY5Y的作用.方法 CCK-8法、集落克隆法和流式细胞术检测不同浓度阿美替尼(0、2、4、8 μmol/L)对SH-SY5Y细胞增殖、细胞存活和细胞凋亡的影响;透射电镜观察阿美替尼处理后SH-SY5Y细胞亚显微结构;Transwell小室实验检测阿美替尼对SH-SY5Y细胞侵袭及迁移的作用;Western blot实验检测阿美替尼对SH-SY5Y细胞凋亡和侵袭迁移相关蛋白Bax、Bcl-2、E-Cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9表达的影响;SH-SY5Y细胞注射到5周龄BALB/C裸鼠皮下,建立裸鼠皮下瘤动物模型,每组6只,设置空白对照组、阿美替尼处理组(15 mg/kg)、阳性药环磷酰胺处理组(20 mg/kg),测量裸鼠肿瘤体积及体质量变化,HE染色观察阿美替尼对荷瘤裸鼠心、肝、脾、肺、肾的毒副作用.结果 CCK-8结果表明,相比于对照组,阿美替尼能够抑制SH-SY5Y细胞增殖(P<0.05),其作用24、48、72h的IC50分别为5.004、3.728、3.228 μmol/L;集落克隆结果表明阿美替尼能够抑制SH-SY5Y细胞存活;流式细胞术结果表明阿美替尼诱导SH-SY5Y细胞发生凋亡(P<0.05),透射电镜下观察到阿美替尼处理后具有典型的细胞凋亡形态学特征;Transwell小室实验结果表明阿美替尼能够抑制SH-SY5Y细胞的侵袭迁移能力(P<0.01);Western blot实验结果表明阿美替尼处理后SH-SY5Y细胞中E-Cadherin、Bax蛋白表达水平上调,Bcl-2、Vimentin、MMP2、MMP9蛋白表达水平下调(P<0.05);动物实验结果表明阿美替尼能够抑制神经母细胞瘤的生长,HE染色结果表明阿美替尼没有对小鼠脏器产生明显毒性.结论 阿美替尼能够抑制神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞增殖并诱导细胞发生凋亡,通过下调MMP2、MMP9蛋白表达,从而抑制神经母细胞瘤侵袭和迁移.
关键词：神经母细胞瘤阿美替尼增殖凋亡侵袭迁移上皮间质转化
资助基金：安徽省重点研究与开发计划资助项目(202104g01020017)安徽省优秀科研创新团队项目(2022AH010084)蚌埠医学院重大科技项目(2020byfy001)安徽省大学生创新创业项目(S202110367026)
论文发表日期：2023-09-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1493-1499 )
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