莪术醇逆转胶质瘤细胞对替莫唑胺的耐药:基于调节UTX/MGMT轴
孙江川
邢家恒
谭茹雪
钱颖
田男
浙江中医药大学生命科学学院,浙江 杭州 310053
摘要：目的 探讨莪术醇在逆转胶质瘤原发性耐药方面的作用及其潜在机制.方法 将胶质瘤细胞分为以下主要分组:以0、10、20、40 μg/mL浓度莪术醇处理胶质瘤细胞,选择40 μg/mL莪术醇处理;通过慢病毒转染构建UTX过表达的胶质瘤细胞,空白对照组、莪术醇组(40 μg/mL)、UTX过表达组(UTX过表达细胞)、UTX过表达和莪术醇联合处理组(40 μg/mL莪术醇处理UTX过表达细胞);空白对照组、莪术醇组(40 μg/mL)、莫唑胺(TMZ)组(10 μg/mL)、莪术醇(40 μg/mL)和TMZ(10 μg/mL)联合处理组.将16只裸鼠随机分为空白对照组、莪术醇组(20 mg/kg)、TMZ组(20 mg/kg)、莪术醇(20 mg/kg)和TMZ(20 mg/kg)联合处理组,4只/组,构建BALB/c裸鼠移植瘤模型.MTT法、细胞克隆形成实验检测细胞的活力和克隆形成能力;流式细胞术检测细胞凋亡情况(TMZ预处理10 μg/mL);UTX活性试剂盒检测细胞内的UTX活性;ChiP-qPCR检测MGMT启动子区域的UTX、H3K27me3的富集程度;Western blot和免疫组化检测胶质瘤细胞内的蛋白表达情况.结果 莪术醇能显著抑制胶质瘤细胞的增殖能力(P<0.05,P<0.01),并促进胶质瘤细胞的凋亡(P<0.01).莪术醇能抑制体内胶质瘤瘤体的生长增殖(P<0.01),而TMZ则无显著效果(P>0.05).莪术醇能显著抑制胶质瘤细胞内的UTX活性(P<0.01),增加H3K27me3的蛋白表达水平.UTX过表达细胞系的UTX活性显著升高(P<0.01),UTX蛋白表达增加且H3K27me3蛋白表达减少,UTX过表达能显著逆转莪术醇抑制胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡的作用(P<0.01).莪术醇能降低UTX和H3K27me3在MGMT启动子区域的富集程度(P<0.05,P<0.01).莪术醇能降低MGMT蛋白表达水平,UTX过表达则能逆转该作用.在体内和体外实验中,莪术醇与TMZ联用均能提高胶质瘤细胞内的H3K27me3蛋白表达水平,降低下游靶基因MGMT的表达,进而增强胶质瘤细胞对TMZ的敏感性.结论 莪术醇能够通过调控UTX/MGMT轴增强胶质瘤细胞对TMZ的敏感性.
关键词：胶质瘤替莫唑胺莪术醇UTX凋亡耐药性
资助基金：浙江省自然基金科研项目(GK2020;772213D00801)浙江中医药大学校级科研项目(2022GJYY026)
论文发表日期：2023-10-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 1697-1705 )
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