SPP1在肾缺血再灌注诱导的急性肾损伤中的作用及机制
虞亘明1
王鑫玮2
骆金光1
苏萧2
陶怀祥1
闻志远2
关翰1
1.蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科,安徽 蚌埠 233004;蚌埠医学院慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 2330302.蚌埠医学院第一附属医院泌尿外科,安徽 蚌埠 233004
摘要：目的 探究SPP1基因在肾脏缺血再灌注损伤(IRI)中的作用及机制.方法 GSE131454数据集显示了肾I/R组和Sham组基因的差异表达.在GSE131454数据库中搜索,通过相关文献我们选择了SPP1作为研究对象.12只SD大鼠随机分为缺血再灌注组(IRI组)和假手术组(Sham组),各6只,IRI组使用无损伤显微血管夹钳夹肾蒂使肾脏缺血30 min,Sham组不做处理.采集肾组织并检测两组大鼠血清肌酐、尿素氮的变化,PAS染色检测两组肾脏组织病理变化,免疫组化检测SPP1基因和α-SMA基因表达变化.免疫荧光染色检测肾脏SPP1和Caspase-3的表达.肾小管上皮HK-2细胞缺氧复氧(H/R)模型分为Control组和H/R组,Western blot检测各组SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白的相对表达.HK-2细胞分别转染si-NC和si-SPP1,检测各组干扰效率后分为si-NC+Control组、si-NC+H/R组、si-SPP1+H/R组,Western blot检测各组细胞中Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量,流式细胞术检测各组细胞凋亡率.结果 IRI组大鼠血清肌酐、尿素氮相比Sham组含量显著增加(P＜0.05),并观察到严重的肾小管上皮细胞脱落及坏死.在大鼠肾脏缺血再灌注损伤后,肾脏组织中SPP1和α-SMA含量显著增加(P＜0.05).与Sham组相比,IRI组大鼠组织显示SPP1和Caspase-3的荧光强度显著升高(P＜0.05).肾小管上皮细胞缺氧复氧后SPP1、Caspase-3、Kim-1蛋白表达显著增加(P＜0.05).si-SPP1组细胞SPP1蛋白表达低于si-NC组细胞(P＜0.05).si-NC+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和凋亡率均高于si-NC+Control组(P＜0.05),si-SPP1+H/R组的Caspase-3、Kim-1蛋白相对表达量和调亡率均低于si-NC+H/R组(P＜0.05).结论 SPP1在肾脏缺血再灌注损伤中的表达上调,下调SPP1表达可抑制H/R肾小管上皮细胞调亡.
关键词：缺血再灌注损伤SPP1HK-2细胞大鼠缺氧复氧模型细胞凋亡
资助基金：安徽省自然科学基金重点项目(2008085QH358)慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室开放课题(AHIAI2022K01)
论文发表日期：2023-11-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1947-1954 )
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