甲基化酶WTAP通过调控FOXO1的表达参与肾缺血再灌注损伤
赵刚刚1
李华锋1
张鸿毅1
肖克兵1
杨辉1
李子峰1
傅崇德2
1.西安医学院第一附属医院泌尿外科,陕西 西安 7100002.西安航天总医院泌尿外科,陕西 西安 710100
摘要：目的 探讨m6A甲基化酶WTAP在小鼠肾缺血再灌注(I/R)损伤中的表达情况及对肾小管上皮细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制.方法 C57BL/6小鼠随机分为假手术组(sham组)、I/R组,8只/组,建立急性缺血肾损伤模型;全自动生化分析仪检测血中尿素氮(BUN)及肌酐(Scr)水平评估肾功能;HE染色检测肾组织病理和形态改变;IHC检测肾组织中WTAP和FOXO1蛋白的表达;人肾小管上皮细胞(HK-2)分为Control、H/R、si-NC、si-WTAP、si-NC+H/R、si-WTAP+H/R组;Western blot检测蛋白表达;qRT-PCR检测mRNA水平;CCK8检测细胞活性;TUNEL染色法检测细胞凋亡;试剂盒分别检测LDH的释放水平和Caspase-3活性;SRAMP( mRNA的相互作用;MeRIP-qPCR检测m6A修饰FOXO1的水平.结果 与sham组相比,I/R组Scr、BUN水平显著升高(P＜0.001),WTAP mRNA和蛋白水平都显著升高(P＜0.001).与正常HK-2细胞相比,H/R组细胞活性显著下降(P＜0.01),LDH的释放水平显著升高(P＜0.001),WTAP的mRNA和蛋白水平都显著升高(P＜0.001).抑制WTAP表达,上述细胞损伤减弱,FOXO1的mRNA和蛋白水平都显著下降(P＜0.01).WTAP与FOXO1 mRNA结合,抑制WTAP表达能够显著降低FOXO1 m6A水平(P＜0.001).结论 WTAP在体内外肾缺血再灌注损伤模型中表达均上调;体外抑制WTAP能够抵抗H/R诱导的凋亡损伤,这可能与其介导的FOXO1 m6A调控有关.
关键词：WTAPm6AFOXO1肾缺血再灌注损伤细胞凋亡
资助基金：西安航天总医院医学科研立项项目(2022KY006)
论文发表日期：2023-12-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 2035-2042 )
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