RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭和糖酵解
颜秋霞1
曾鹏2
黄树强3
谭翠钰3
周秀琴3
乔静3
赵晓英3
冯玲3
朱振杰3
张国志3
胡鸿3
陈彩蓉1
1.广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖医学中心,广东 清远 511518;广东省尿控及生殖医学创新工程技术研究中心,广东 清远 5115182.广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院泌尿外科,广东 清远 511518;广东省尿控及生殖医学创新工程技术研究中心,广东 清远 5115183.广州医科大学附属第六医院//清远市人民医院生殖医学中心,广东 清远 511518
摘要：目的 探讨X连锁RNA结合基序蛋白(RBMX)对膀胱癌细胞(1376细胞和UC-3细胞)的增殖、迁移、侵袭的影响以及其在糖酵解中的作用.方法 采用慢病毒表达系统和siRNA干扰技术,分别构建RBMX过表达和敲低的膀胱癌细胞模型(1376细胞和UC-3细胞).采用RT-qPCR和Western blotting分别在mRNA水平和蛋白水平上检测细胞模型是否构建成功.通过EdU增殖实验和克隆形成实验检测过表达和敲低RBMX后细胞的生长和集落形成能力,同时通过Transwell实验分析过表达和敲低RBMX后对细胞迁移、侵袭能力的影响;随后,采用Western blotting检测过表达和敲低RBMX后糖酵解关键蛋白PKM1(M1型丙酮酸激酶)和PKM2(M2型丙酮酸激酶)的表达变化;最后,利用葡萄糖和乳酸检测试剂盒分析过表达和敲低RBMX对膀胱癌细胞糖酵解的影响.结果 RT-qPCR和Western blotting结果显示,过表达RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著高于阴性对照组(P<0.05),敲低RBMX膀胱癌细胞的mRNA和蛋白表达水平显著低于阴性对照组(P<0.05).过表达RBMX明显抑制膀胱癌细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭,敲低RBMX则作用相反.Western blotting实验结果显示,过表达RBMX使PKM1表达上升,PKM2表达下降,敲低RBMX则作用相反.葡萄糖消耗及乳酸生成实验表明,过表达RBMX均能抑制膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05),敲低RBMX均能促进膀胱癌细胞葡萄糖消耗及乳酸生成(P<0.05).结论 RBMX通过下调PKM2抑制膀胱癌的发生发展和糖酵解能力,有望成为膀胱癌诊断和治疗的潜在分子靶标.
关键词：X连锁RNA结合基序蛋白M2型丙酮酸激酶膀胱癌PKM2糖酵解
论文发表日期：2024-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 9-16 )
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