新风胶囊抑制软骨细胞炎症和细胞外基质降解:基于调控miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴
周巧1
刘健2
万磊2
朱艳3
齐亚军4
胡月迪4
1.安徽中医药大学第二附属医院,安徽 合肥 230061;安徽中医药大学,安徽 合肥 2300122.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 2300313.安徽中医药大学第二附属医院,安徽 合肥 2300614.安徽中医药大学,安徽 合肥 230012
摘要：目的 探讨新风胶囊(XFC)对白介素(IL)-1β诱导的软骨细胞功能的影响及作用机制.方法 构建IL-1β诱导的软骨细胞炎症模型;SD大鼠灌胃制备XFC含药血清.细胞增殖实验(CCK-8)和流式细胞术筛选最佳XFC含药血清浓度;双荧光素酶报告分析miR-502-5p和TRAF2的靶向关系.构建miR-502-5p抑制表达质粒(inhibitor)及阴性对照组,转染至软骨细胞中.分为对照组(NC),IL-1β组,XFC组,IL-1β+NC-inhibitor,IL-1β+miR-502-5p inhibitor,IL-1β+miR-502-5p inhibitor+XFC最佳含药血清组,酶联免疫吸附试验(ELASA)检测IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-4、IL-10的水平.逆转录PCR(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹实验(WB)、免疫荧光法检测Ⅱ型胶原α1(COL2A1)、基质金属蛋白酶13(MMP13)、软骨蛋白聚糖抗体(ADAMTS5)和miR-502-5p/TRAF2/NF-κB基因的表达.结果 与NC组相比,IL-1β组中软骨细胞活力下降,细胞凋亡率升高,且miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降,IL-1β、TNF-α和ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高(P<0.05).筛选得出20%XFC为最佳含药血清浓度.与IL-1β组相比,XFC含药血清干预后,软骨细胞活力升高,细胞凋亡率下降,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达下降,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达升高(P<0.05).与NC-inhibitor相比,转染miR-502-5p inhibitor后,IL-1β、TNF-α、ADAMTS5、MMP13、TRAF2、NF-κB p65表达升高,miR-502-5p、IL-4、IL-10和COL2A1表达下降;与miR-502-5p inhibitor相比,将miR-502-5p inhibitor转染的软骨细胞和最佳XFC含药血清共培养后,XFC含药血清能逆转miR-502-5p抑制状态对软骨细胞炎症和ECM的影响.结论 XFC抑制软骨细胞炎症、细胞外基质降解,减轻IL-1β诱导的软骨细胞损伤,其机制可能是通过调节miR-502-5p/TRAF2/NF-κB轴.
关键词：miR-502-5p骨关节炎新风胶囊炎症细胞外基质
论文发表日期：2024-01-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 108-118 )
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