脊髓康通过激活星形胶质细胞的YAP/PKM2信号轴促进脊髓损伤大鼠神经功能的恢复
满豪1
王建伟2
吴毛2
邵阳2
杨俊锋2
李绍烁2
吕锦业1
周悦2
1.南京中医药大学,江苏 南京 210023;无锡市中医医院,江苏 无锡 2140712.无锡市中医医院,江苏 无锡 214071
摘要：目的 研究中药脊髓康含药血清联合SRY转录盒因子2(SOX2)诱导星形胶质细胞重编程为神经元的作用机制.方法 将30只成年SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(SCI组)和治疗组,10只/组.SCI组和治疗组均采用改良Allen法构建脊髓损伤大鼠模型,于术后分别给予生理盐水、脊髓康等量灌胃.在术前1 d、术后3、7、14 d进行Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分和斜板实验.相同方法构建脊髓损伤大鼠模型,提取损伤部位组织进行单细胞RNA测序,再使用生物信息学对"脊髓康"、"脊髓损伤"、"糖酵解"关联基因进行靶点分析.成年SD大鼠以生药量15 g·kg-1·d-1脊髓康灌胃,连续3 d后腹主动脉采血制备脊髓康含药血清.体外培养大鼠幼仔皮层脑组织三代星形胶质细胞,分为SOX2组、SOX2+JSK组.SOX2组加入10 mmol/L SOX2;SOX2+JSK组加入10 mmol/L SOX2、2.5％脊髓康含药血清.培养21 d后,Western blot检测细胞中丙酮酸激酶M2型(PKM2)、磷酸化丙酮酸激酶M2型(p-PKM2)、Yes-相关蛋白(YAP)表达,使用免疫荧光多标染色观测PKM2与YAP共定位情况.结果 治疗组大鼠的BBB评分与斜板实验角度明显提升,且各时段均优于SCI组(P<0.05).SCI部位PKM2基因在各类细胞中均有高活性表达;生物信息学分析靶点指向HIPPO-YAP信号通路;与SOX2组比较,整个细胞中SOX2+JSK组PKM2表达增高(P<0.05)、p-PKM2、YAP表达亦升高(P<0.001),且更多PKM2磷酸化入核.SOX2+JSK组PKM2与YAP共定位情况高于SOX2组.结论 中药脊髓康含药血清联合SOX2可能通过提高糖酵解中PKM2与YAP共定位,从而将星形胶质细胞重编程诱导为神经元细胞,促进神经损伤修复.
关键词：脊髓损伤星形胶质细胞有氧糖酵解脊髓康PKM2YAP
论文发表日期：2024-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 636-643 )
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