锌指蛋白-36缺陷抑制小鼠的成骨细胞分化:基于激活ERK/MAPK通路
戎圣炜1
李宏芳2
魏怡然1
冯子航1
甘露1
邓仲豪1
赵亮1
1.南方医科大学南方医院关节与骨病外科,广东 广州 5105152.北京怡健殿诊所,北京 100033;北京大学国际医院健康管理中心,北京 102206
摘要：目的 探究锌指蛋白-36(ZFP36)对成骨细胞分化的调控作用及机制.方法 通过提取小鼠原代骨髓间充质干细胞,结合小鼠成骨细胞前体细胞系MC3T3-E1,在体外成骨分化诱导状态下观察Zfp36(编码ZFP36)的表达变化.通过干扰RNA技术构建Zfp36缺陷的细胞,观察成骨分化作用的改变.通过第二代转录组测序技术探究Zfp36缺陷细胞成骨分化过程中的转录组水平改变.通过ERK/MAPK信号抑制分子U0126验证Zfp36缺陷对成骨分化作用的调控机制.结果 小鼠原代骨髓间充质细胞以及MC3T3-E2细胞中Zfp36表达在成骨分化0～14 d过程中呈逐渐升高趋势,在第7天到达峰值时较第0天升高3.85倍(P<0.0001).抑制上述细胞Zfp36的表达后,成骨分化过程中碱性磷酸酶染色及茜素红染色弱于对照组,成骨分化标志基因Alpl(P<0.01)、Sp7(P<0.001)、Bglap(P<0.01)、Ibsp(P<0.0001)表达显著减弱.转录本测序结果提示Zfp36缺陷细胞的下调基因富集到骨矿化相关基因集中,且与ERK信号相关.蛋白表达检测显示Zfp36缺陷细胞的磷酸化ERK蛋白比例较对照组升高2.1倍(P=0.0274).通过分子化合物U0126抑制Zfp36缺陷细胞中被激活的ERK/MAPK信号,可观察到表型挽救现象,并且呈剂量依赖.Zfp36缺陷细胞在10μmol/L度U0126作用下碱性磷酸酶染色增强,成骨细胞分化标志基因Runx2(P<0.05)及Bglap(P<0.05)表达显著增高.结论 ZFP36参与了小鼠成骨细胞的分化调控过程,Zfp36缺陷会引起ERK/MAPK信号通路的激活,进而抑制成骨细胞向骨细胞的分化.
关键词：锌指蛋白-36成骨细胞分化ERK/MAPK信号通路骨髓间充质干细胞
论文发表日期：2024-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 697-705 )
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