地五养肝方对非酒精性脂肪肝小鼠循环外泌体溶血甘油磷脂的调控作用
陈光亚1
向星亮2
曾兆祥2
黄荣增2
金姝娜3
肖明中4
宋成武5
1.湖北中医药大学药学院,湖北 武汉 430065;鄂州市中心医院药学部,湖北 鄂州 4360002.湖北中医药大学药学院,湖北 武汉 4300653.湖北中医药大学基础医学院,湖北 武汉 4300654.湖北省中医院肝病研究所,湖北 武汉 4300005.湖北中医药大学药学院,湖北 武汉 430065;湖北时珍实验室,湖北 武汉 430065;湖北中医药大学肝脏疾病中医药现代化研究中心,湖北 武汉 430065
摘要：目的 研究地五养肝方对非酒精性脂肪肝(NAFLD)小鼠循环外泌体溶血甘油磷脂(Lyso-GPLs)的调控作用.方法 采用尺寸排阻色谱法分离血液中循环外泌体,运用透射电镜观察外泌体的外观、粒径仪检测外泌体直径分布、Western blotting法检测外泌体表面特异性蛋白CD9,CD63及TSG101的表达;将24只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组和复方给药组,8只/组,正常组给予标准饲料,模型组和复方给药组饲喂高脂饲料,喂养1周后,各给药组小鼠按剂量给予地五养肝胶囊内容物,正常组和模型组给予等量生理盐水,灌胃给药4周.末次给药后,各小鼠麻醉后取血分离血清,检测总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST),观察其对NAFLD的改善作用并提取血清中循环外泌体;同时,结合多元统计分析,筛选NAFLD小鼠循环外泌体中Lyso-GPLs类成分生物标志物,观察地五养肝方对标志物的调控作用.结果 透射电镜结果显示外泌体大小在100 nm左右,形状为典型的具有清晰双层膜的茶托样结构;粒径结果显示循环外泌体粒径分布均匀,平均粒径为137.5 nm;Western blotting检测结果表明外泌体表面特异性蛋白CD9,CD63及TSG101的存在;模型组小鼠血清中TC、HDL-C、LDL-C和AST水平显著高于正常组(P<0.01),经地五养肝方治疗后,TC、LDL-C、AST、ALT水平显著回调(P<0.01),并筛选出43个经地五养肝方治疗后呈现显著回调趋势(P<0.01)的Lyso-GPLs标志物成分.结论 地五养肝方防治NAFLD的作用机制涉及对循坏外泌体溶血甘油磷脂的改善和调控作用,为其防治慢性肝病的作用机制研究提供了新的科学视角.
关键词：地五养肝方循环外泌体液质联用溶血甘油磷脂非酒精性脂肪肝
资助基金：湖北省中医药管理局中医药青年人才项目(ZY2023Q040)
论文发表日期：2024-07-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1382-1388 )
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