血小板特异性Rictor敲除抑制小鼠血小板生成和活化及血栓形成
龙清
杨峻
刘安玲
南方医科大学生物化学与分子生物学教研室,广东 广州 510515
摘要：目的 探究Rictor对血小板活化和血栓形成的影响.方法 利用PF4-Cre、Rictorfl/fl转基因小鼠,构建血小板特异性Rictor敲除小鼠和野生型小鼠,分别设为敲除组和对照组(总实验小鼠n=65),用于后续实验.Western blotting检测小鼠Rictor蛋白、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT的表达水平.血常规检测敲除和对照组小鼠血小板数目.尾静脉出血实验检测敲除和对照小鼠止血功能.构建静脉血栓模型检测Rictor敲除对血栓形成的影响.使用ADP和凝血酶刺激血小板,检测Rictor敲除对血小板聚集的影响.流式细胞术分析敲除组和对照组血小板在静息态和活化态整合素αIIbβ3与CD62P的表达水平.检测血浆中PF4水平.vWF免疫组化标记巨核细胞.用APC-CD41抗体孵育敲除和对照小鼠的巨核细胞,流式细胞术检测细胞倍体.扫描电镜检测敲除和对照组血小板在胶原表面的伸展变化.结果 与对照小鼠相比,血小板Rictor特异性敲除小鼠AKT磷酸化降低(P<0.001),血小板生成减少(P<0.05),血栓形成受到抑制(P<0.05),血小板对ADP和凝血酶刺激的活化水平降低(P<0.01),P-选择素蛋白表达水平(P<0.05)、整合素αIIbβ3活化程度(P<0.01)受到抑制,血小板伸展受到抑制(P<0.01),PF4的血浆含量降低(P<0.05),骨髓中巨核细胞数量减少(P<0.01),倍体降低(P<0.05),前血小板平均面积减少(P<0.01).结论 血小板特异性敲除Rictor抑制血小板生成和活化,进而减少血栓形成.抑制mTORC2活性可能是一种潜在的抗血栓靶标.
关键词：Rictor血小板血栓形成
资助基金：中国博士后科学基金(2023M731541)
论文发表日期：2024-08-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 1605-1611 )
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