高表达RNF7增强非小细胞肺癌细胞的PD-1耐药:基于活化NF-kB通路促进CXCL1表达和髓源性抑制细胞的募集
钟娜1
王会杰1
赵文英1
孙珍贵2
耿彪2
1.皖南医学院第一附属医院肿瘤内科,安徽 芜湖 2410002.皖南医学院第一附属医院呼吸与危重症医学科,安徽 芜湖 241000
摘要：目的 探讨RNF7在非小细胞肺癌(NSCLC)中调控髓源性抑制细胞(MDSCs)的作用机制.方法 采用TIMER2.0数据库和免疫组织化学染色分析(IHC)分析RNF7在NSCLC中表达水平.Kaplan-Meier曲线分析RNF7对肺癌患者预后的影响.通过TIMER2.0数据库和多重免疫荧光分析评估RNF7的表达与肿瘤免疫细胞浸润水平之间的相关性.通过C57BL/6小鼠建立皮下移植瘤模型,将RNF7过表达对照组(lenti-GFP,n=10)和RNF7过表达组(lenti-RNF7,n=10),RNF7敲低对照组(Ctrl,n=12)和RNF7敲低组(shRNF7,n=12)的CMT-167细胞分别种植到小鼠皮下,对于RNF7敲低对照组和RNF7敲低组的小鼠7 d后给予anti-PD-1治疗或同型IgG治疗,30 d后获取肿瘤组织,观察皮下瘤体积.通过IHC检测肿瘤组织中S100A8+A9、Gr-1的表达水平,流式细胞术检测肿瘤组织中MDSCs的浸润程度.基因集富集分析(GSEA)RNF7在非小细胞肺癌中可能的调控通路.Western blotting和荧光素酶检测RNF7对NF-κB信号通路的影响.ELISA和RT-qPCR观察趋化因子(C-X-C基序)配体1的表达情况.结果 TCGA数据库分析显示RNF7在NSCLC中的表达水平显著上调,生存分析显示,肺癌患者中RNF7的表达水平越高,患者的预后越差(P<0.001),TIMER2.0数据库显示RNF7的表达与MDSCs的浸润程度呈正相关(P<0.001).GESA分析提示,在NSCLC中,RNF7高表达富集于NF-κB信号通路.Western blotting实验显示,RNF7低表达能够抑制NF-κB信号通路激活.通过ELISA和RT-qPCR结果显示,敲除RNF7可显著降低CXCL1的转录和翻译(P<0.01).小鼠皮下移植瘤实验显示,与对照组相比,过表达RNF7可增加MDSCs的浸润程度,敲除RNF7减少MDSCs的浸润程度(P<0.001).并减轻MDSCs对效应细胞的免疫抑制功能,从而增强了抗PD-1的功效.结论 RNF7通过激活NF-κB信号通路,促进CXCL1的表达,从而使MDSCs趋化募集,使肿瘤产生抗PD-1耐药.
关键词：RNF7非小细胞肺癌NF-κB通路MDSCs抗PD-1治疗
资助基金：安徽省高校重大自然科学研究项目(2023AH040266)安徽省自然科学基金项目(2008085QH351)安徽省教育厅重点项目(KJ2021A0838)
论文发表日期：2024-09-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：8( 1704-1711 )
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