SPHK1靶向NF-κB信号通路调控胃癌细胞的迁移与侵袭
凌潜龙1
纪凯2
陈金业3
管佳佳3
王睿朋3
满文江2
朱冰3
1.蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科,安徽 蚌埠 233000;安徽省第二人民医院外科,安徽 合肥 2300002.蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科,安徽 蚌埠 233000;海军军医大学第一附属医院//上海长海医院肛肠外科,上海 2000823.蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科,安徽 蚌埠 233000
摘要：目的 探讨鞘氨醇激酶-1(SPHK1)在胃癌(GC)组织中的表达及其靶向核因子-κB(NF-κB)调控GC细胞迁移和侵袭能力的分子机制.方法 基于TIMER2.0、GEPIA与HPA数据库分析SPHK1在GC组织中的表达.使用Kaplan-Meier Plotter数据库预测SPHK1与GC患者预后的关联.利用IHC检测GC及癌旁组织中SPHK1和MKI67的表达并分析两者相关性.运用Western blotting与qRT-PCR检测GC各细胞系中SPHK1蛋白及mRNA水平.基因富集通路数据库检索SPHK1对GC进展的生物学功能.使用慢病毒敲低HGC-27/过表达MGC-803细胞中SPHK1的表达;采用细胞划痕实验探究SPHK1对GC细胞迁移能力的影响;Transwell实验探究SPHK1对GC细胞迁移和侵袭能力的作用;通过Western blotting检测各蛋白表达情况.体内成瘤实验中,将裸鼠随机分为shNC组、shSPHK1组、oeNC组与oeSPHK1组,利用稳转株验证SPHK1的促癌作用.结果 生物信息学表明SPHK1在GC组织中显著高表达(P<0.001);同时高表达的SPHK1预示着较差的总生存期(P<0.001)和进展后总生存期(P<0.001)以及更差的无复发生存期(P<0.001).IHC结果表明GC组织中SPHK1与MKI67表达明显上调(P<0.001)且呈正相关(P<0.001).基因富集通路数据库提示,SPHK1参与GC中的细胞黏附、迁移及血管生成等,且NF-κB参与GC进展(P<0.05).细胞实验数据显示,抑制SPHK1减弱GC细胞的迁移和侵袭能力,而过表达SPHK1会产生相反的结果(P<0.01);SPHK1正向调节磷酸化P65(p-P65)、血管内皮生长因子(VEGFA)和白细胞介素(IL-17)蛋白表达(P<0.05);利用PDTC阻断NF-κB信号通路可削弱SPHK1促进的GC细胞迁移与侵袭能力以及各蛋白表达水平(P<0.01);动物实验表明,与NC组相比,shSPHK1组肿瘤大小和质量明显减小,而oeSPHK1组显著增加(P<0.001).结论 SPHK1可靶向NF-κB信号通路表达进而调控GC细胞的迁移与侵袭,提示SPHK1可能是GC进展的潜在诊断分子标志物.
关键词：胃癌鞘氨醇激酶-1NF-κB迁移侵袭
资助基金：安徽省高校科学研究重大项目(KJ2021ZD0090)蚌埠医学院研究生科研创新项目(Byycx22090)安徽省新时代育人质量工程研究生教育项目(2023xscx125)
论文发表日期：2024-11-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 2163-2171 )
英文信息