AURKB通过DHX9激活NF-κB信号通路促进骨肉瘤细胞恶性表型
钟彦鑫1
刘宇1
童未来1
谢新生2
聂江波1
杨枫1
刘志礼1
刘家明1
1.南昌大学第一附属医院骨科,江西南昌 330006;脊柱脊髓系统疾病江西省重点实验室,江西 南昌 3300062.南昌大学第一附属医院医学研究公共服务中心,江西南昌 330006
摘要：目的 探讨AURKB在促进骨肉瘤细胞恶性表型中的具体调控机制.方法 分别转染HA-Vector和HA-AURKB于293T细胞中,采用免疫沉淀结合液相色谱-串联质谱技术筛选AURKB的潜在互作分子,免疫共沉淀和Western blotting验证其互作分子.通过RNA干扰技术,干扰骨肉瘤细胞中AURKB的表达;设置对照组:转染对照组慢病毒143B细胞,sh-AURKB组:转染干扰AURKB慢病毒143B细胞,sh-con+Flag-DHX9组:对照组转染过表达DHX9慢病毒,sh-AURKB+Flag-DHX9组:沉默AURKB组转染过表达DHX9慢病毒.采用EDU、Transwell实验分别观测细胞的增殖、迁移和侵袭活性.机制分析采用Co-IP、体内泛素化实验等检测AURKB和DHX9的相互作用、DHX9磷酸化水平、DHX9泛素化水平.Western blotting检测AURKB及DHX9对NF-κB的信号激活作用.结果 AURKB在骨肉瘤细胞系高表达.沉默骨肉瘤143B细胞中AURKB的表达,细胞增殖、迁移和侵袭能力下降(P＜0.05).而AURKB与DHX9存在相互作用,且AURKB及DHX9在骨肉瘤组织中均高表达,沉默AURKB能够降低DHX9的蛋白表达,过表达AURKB后DHX9磷酸化水平升高(P＜0.05).沉默AURKB后不影响DHX9的转录翻译,但可以加快DHX9降解速度及增加DHX9泛素化水平.此外,过表达DHX9可以逆转沉默AURKB对IKBα蛋白及磷酸化p65的影响,促进p65入核激活NF-κB信号通路,并且增强了骨肉瘤细胞增殖、迁移和侵袭能力.结论 AURKB通过调控DHX9激活NF-κB信号通路,促进骨肉瘤细胞恶性表型.
关键词：骨肉瘤AURKBDHX9磷酸化
资助基金：江西省自然科学基金项目(20192ACBL21041)江西省自然科学基金项目(20232ACB206043)
论文发表日期：2024-12-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 2308-2316 )
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