高表达CRTAC1通过调控PI3K信号通路促进胃癌细胞增殖、迁移及免疫浸润
张富星1
刘国庆1
董锐1
高磊1
陆伟晨1
高连霞1
赵忠扩2
陆飞2
刘牧林1
1.蚌埠医科大学第一附属医院胃肠外科,安徽 蚌埠 2330002.浙江大学第四人民医院,浙江 义乌 322000
摘要：目的 探究软骨酸性蛋白1(CRTAC1)参与影响胃癌生物学行为和免疫浸润的机制.方法 采用转录组分析CRTAC1在胃癌肿瘤细胞中表达与预后的关系,GO和KEGG富集分析CRTAC1表达水平可能参与细胞的功能及信号通路.ESTIMATE算法分析CRTAC1表达对肿瘤微环境及肿瘤突变负荷的影响.CCK-8、EdU、克隆形成以及流式细胞周期实验检测CRTAC1参与胃癌细胞的增殖.流式细胞凋亡、Hoechst和Western blotting实验检测CRTAC1抑制胃癌细胞凋亡.划痕伤口愈合、Transwell以及Western blotting实验分析CRTAC1参与胃癌迁移的机制.结果 生物信息学分析结果显示:CRTAC1在胃癌和癌旁组织中的表达量差异有统计学意义(P＜0.05);单因素Cox和多因素Cox回归分析表明年龄和分期分别是CRTAC1高表达胃癌患者的预后风险因素(P＜0.001).采用ESTIMATE算法结果显示:CRTAC1的表达增加免疫细胞浸润丰度(P＜0.001);同时CRTAC1高表达减少肿瘤突变负荷(P＜0.001).采用CCK-8、EdU、克隆形成实验检测敲低CRTAC1后明显抑制细胞增值(P＜0.001);流式细胞周期实验检测敲低CRTAC1后细胞阻滞在G1期(P＜0.001).流式细胞凋亡、Hoechst实验结果显示敲低CRTAC1后细胞凋亡增加(P＜0.001);生物信息学预测胃癌患者中CRTAC1与凋亡相关蛋白BAX和BCL2的关系(P＜0.05),Western blotting实验验证敲低CRTAC1后CRTAC1、BAX和BCL2的表达水平变化(P＜0.05).划痕伤口愈合、Transwell实验显示,敲低CRTAC1可抑制细胞的增值迁移(P＜0.001);生物信息学预测胃癌患者中CRTAC1与EMT相关蛋白E-cadherin和Vimentin与CRTAC1的关系(P＜0.05),Western blotting实验验证敲低CRTAC1后E-cadherin和Vimentin的表达水平改变(P＜0.01).KEGG富集分析显示,CRTAC1生物功能可能与PI3K/AKT信号相关,Western blotting实验证实CRTAC1可促进p-PI3K、AKT2、p-AKT、p-mTOR的表达(P＜0.05).结论 CRTAC1在胃癌组织中高表达影响患者的免疫治疗效果和预后,可能通过调控肿瘤突变负荷和肿瘤微环境,以及PI3K/AKT信号通路促进胃癌细胞EMT进程相关.
关键词：CRTAC1胃癌免疫浸润上皮间质转化
资助基金：安徽省高校科研创新团队(2023AH010068)
论文发表日期：2024-12-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：13( 2421-2433 )
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