外泌体miRNA差异表达可作为诊断慢性心力衰竭合并高尿酸血症患者新型分子标志物及靶基因功能分析
陈志亮1
杨永刚2
黄霞1
成彦3
瞿媛4
衡琪琪5
符羽佳5
李可薇5
顾宁1
1.南京中医药大学附属南京中医院心血管病科,江苏南京 2100222.南京中医药大学附属南京中医院检验科,江苏南京 2100223.南京中医药大学附属南京中医院药学部,江苏南京 2100224.南京中医药大学附属南京中医院急诊科,江苏南京 2100225.南京中医药大学,江苏南京 210023
摘要：目的 分析慢性心力衰竭(CHF)合并高尿酸血症(HUA)患者血清外泌体miRNA的差异表达,探讨其作为CHF合并HUA新型诊断分子标志物的可能性,并对差异miRNA进行靶基因功能分析,分析作用靶点.方法 以2020年9月～2023年9月南京中医药大学附属南京中医院心血管病科收治的CHF合并HUA患者为观察组(n=30),选择同期健康志愿者为对照组(n=30).两组各选取6例样本,采用高通量测序分析血清外泌体中的差异表达miRNA,采用RT-PCR检测对未作高通量测序的观察组和对照组样本(n=24)进行验证,使用R软件进行GO、KEGG富集分析,预测差异表达miRNA的作用靶点,并通过动物实验验证临床筛查的差异miRNA.结果 高通量测序分析显示,观察组患者共检测到42个差异表达的miRNA(18个上调,24个下调),其中miR-27a-5p上调(P＜0.001),miR-139-3p下调(P＜0.001).RT-PCR检测显示,观察组患者血清外泌体中miR-27a-5p表达量上调(P=0.004)、miR-139-3p 表达量下调(P=0.005);ROC 曲线下面积(AUC)分析发现,miR-27a-5p、miR-139-3p 预测CHF 合并 HUA 发病的 AUC 分别是 0.708(95％CI:0.562-0.855)和 0.734(95％CI:0.593-0.876),两者联合预测 CHF 与 HUA发病的AUC为0.899(95％CI:0.812-0.987).对差异基因进行GO富集分析发现,细胞自噬是富集程度最高的靶点;KEGG功能注释显示,激活AMPK-mTOR信号通路可能是差异表达的miR-27a-5p和miR-139-3p作用靶点之一.进一步动物实验得到了相同的验证.结论 血清外泌体中miR-27a-5p上调和miR-139-3p下调可作为精准诊断CHF合并HUA的新型分子标志物,激活AMPK-mTOR信号通路后促进心肌细胞的自噬反应可能是差异表达的miR-27a-5p、miR-139-3p的作用靶点之一.
关键词：慢性心力衰竭高尿酸血症外泌体微小RNAAMPKmTOR自噬
资助基金：南京市中医药青年人才培养计划项目(ZYQ20027)南京市中医药科技专项项目(ZYQN202203)南京中医药大学自然科学基金项目(XZR2021052)南京市医疗机构中药传统制剂研究项目(NJCC-ZJ-202315)
论文发表日期：2025-01-19
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：9( 43-51 )
英文信息