miR-155-5p介导PIK3R1负调控PI3K/AKT信号通路促进原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞增殖
张玉如1
万磊2
方昊翔3
李方泽1
王丽文1
李柯霏1
闫佩文1
姜辉1
1.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 2300312.安徽中医药大学第一附属医院,安徽 合肥 230031;新安医学与中医药现代化研究所,安徽 合肥 230012;新安医学教育部重点实验室,安徽 合肥 2300123.安徽中医药大学中医学院,安徽 合肥 230031
摘要：目的 探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞(pSS-HSGECs)的影响.方法 通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系.利用TRAIL及INF-γ刺激细胞,模拟 pSS-HSGECs 细胞模型;空白组:HSGECs,模型组:TRAIL+INF-γ+HSGECs,空转组:TRAIL+INF-γ+HSGECs+miR-155-inhibitor-NC;miR-155 抑制组:TRAIL+INF-γ+IHSGECs+miR-155-inhibitor;CKK-8 法、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、细胞增殖能力.ELISA、RT-PCR方法分别检测相关细胞因子、miR-155-5p表达.蛋白质免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达.结果 双荧光素酶检测结果表明,miR-155-5p与PI3K/AKT通路存在靶向关系,且PIK3R1mRNA为二者的结合位点.与空白组相比,模型组细胞活力、细胞克隆形成能力、IL-10、IL-4水平降低;细胞凋亡率、细胞周期 G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT 比率、PIK3R1mRNA 蛋白相对表达显著升高(P＜0.01).与模型组及空转组相比,miR-155抑制组细胞活力、G1期比例、克隆形成能力、IL-10和IL-4水平上升;同时细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT 比率及PIK3R1蛋白相对表达下降(P＜0.05).结论 miR-155-5p可靶向作用于PI3K1mRNA,负向调节PI3K/AKT信号通路的过表达,改善pSS-HSGECs增殖与凋亡异常,调节炎症反应.
关键词：原发性干燥综合征miR-155-5pPIK3R1PI3K/AKT信号通路炎症因子
论文发表日期：2025-01-19
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：7( 65-71 )
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