穗花杉双黄酮通过抑制细胞焦亡减轻小鼠急性肺损伤
孙亚磊1
罗萌1
郭长胜1
高静2
苏凯奇2
陈立典1
冯晓东1
1.河南中医药大学康复医学院,河南 郑州 4500462.河南中医药大学第一附属医院康复中心,河南 郑州 450003
摘要：目的 探究穗花杉双黄酮(AF)通过抑制NLRP3/ASC/Caspase-1轴介导的细胞焦亡减轻急性肺损伤(ALI)的机制.方法 体内实验中,将60只BALB/c雌性小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(LPS组)、AF低剂量治疗组(LPS+AF-LD组)、AF中剂量治疗组(LPS+AF-MD组)、AF高剂量治疗组(LPS+AF-HD组),12只/组.灌胃给药0.5 h后气管滴注LPS造模,6 h后取材.体外细胞实验中,将RAW264.7细胞分为对照组(Control组)、模型组(LPS+ATP组)、AF治疗组(LPS+ATP+AF组)、焦亡抑制剂组(LPS+ATP+AC组)、联合处理组(LPS+ATP+AF+AC组),药物预处理2 h后进行造模、指标检测.HE染色法观察肺组织的病理改变,同时检测肺肿胀程度、BALF中蛋白水平、肺组织MPO水平.采用CCK-8法检测AF的细胞增殖毒性及对细胞活力的影响.ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α水平,通过免疫组化、免疫荧光、免疫印迹等方法检测NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1、GSDMD N等蛋白水平.结果 在体内实验中,相较于LPS组,AF药物治疗能改善小鼠肺组织的病理损伤状态,改善肺肿胀程度,降低BALF中蛋白水平、肺组织MPO水平(P<0.01).AF药物治疗抑制了NLRP3/ASC/Caspase-1轴的高表达(P<0.01),对于细胞焦亡的核心基因GSDMD N起到抑制效应(P<0.01),减少了细胞焦亡导致的IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α等炎性因子释放(P<0.01).在细胞实验中,通过细胞增殖毒性实验确定了AF的安全浓度,AF能够减少由于LPS+ATP刺激导致的细胞死亡(P<0.01),抑制NLRP3/ASC/Caspase-1轴的高表达,降低GSDMD N及炎症因子的表达水平(P<0.01).焦亡抑制剂显示出与AF药物治疗类似的效果,而联合处理组的效果更加明显.结论 AF可能通过抑制NLRP3/ASC/Caspase-1轴介导的细胞焦亡发挥减轻ALI的效应.
关键词：穗花杉双黄酮急性肺损伤细胞焦亡NLRP3/ASC/Caspase-1轴
资助基金：河南省重点研发与推广专项(科技攻关)项目(242102310508,252102310456)河南省双一流创建学科中医学科学研究专项(HSRP-DFCTCM-2023)河南中医药大学博士科研启动项目(00104311-2024-2-33)
论文发表日期：2025-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 692-701 )
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