正肝方对二乙基亚硝胺诱导的肝癌大鼠的抗癌作用及机制:基于激活Hippo/YAP通路
宋添力1
王一民1
孙童2
刘绪3
黄胜1
冉云2
1.湖北民族大学医学部,湖北 恩施 445000;湖北民族大学风湿性疾病发生与干预湖北省重点实验室,湖北 恩施 4450002.北京中医药大学深圳医院(龙岗)肝病科,广东 深圳 5181723.湖北民族大学医学部,湖北 恩施 445000
摘要：目的 探讨正肝方通过调控Hippo/YES-相关蛋白同源癌蛋白(YAP)信号通路对二乙基亚硝胺(DEN)诱导的肝癌大鼠模型的抗癌作用及对肝癌潜在的抑制机制.方法 将80只SD大鼠随机分为正常对照组(n=10)、造模组(n=70).造模组通过连续12周腹腔注射DEN(50 mg/kg)建立肝癌模型.建模成功后,随机分为5组:模型对照组、阳性对照组(槐耳颗粒,4 g/kg)、正肝方低、中、高剂量组(2、4、8 g/kg),n=10.各组接受相应药物干预,1次/d,持续17周.正常对照组和模型组仅灌喂等量纯水.观察大鼠生存状况和生存率,并测定体质量、肝脏指数、脾脏指数和胸腺指数.观测大鼠肝脏组织的形态变化.通过HE染色观察组织病理变化.利用免疫组化技术检测组织中YAP及p-YAP的表达水平.Western blotting检测组织中Hippo/YAP通路中YAP、p-YAP、MST1、LATS1和p-LATS1等相关蛋白表达.结果 与正常对照组相比,模型对照组大鼠生存状况较差,生存率降低,体质量、肝脏指数、脾脏指数升高(P<0.01),胸腺指数降低(P<0.05).正肝方治疗后,肝脏指数、脾脏指数降低(P<0.05),胸腺指数升高(P<0.01).大鼠肝脏组织形态及HE染色结果表明,模型组肝小叶结构受损,肝细胞排列紊乱,正肝方治疗后这些病理变化得到改善.免疫组化结果显示,与模型对照组相比,在正肝方低、中、高剂量组及阳性对照组中,YAP的阳性表达水平逐渐减弱,且与正肝方的剂量呈负相关(P<0.01);而p-YAP的阳性表达则逐渐增强(P<0.01),且与正肝方的剂量呈正相关(P<0.01).Western blotting结果显示,与模型对照组相比,在接受正肝方治疗的各剂量组中,随着药物浓度的增加,YAP蛋白表达水平随着药物剂量的增加而降低(P<0.001),p-YAP的阳性表达水平逐渐升高,尤其在高剂量组中这一变化更为明显(P<0.001);正肝方各剂量组及槐耳颗粒组治疗组的组织中MST1蛋白表达明显升高(P<0.05).同时,正肝方用药组的组织中,LATS1和p-LATS1蛋白的水平也明显升高,且与正肝方的剂量呈正相关.结论 正肝方可以通过调节激活Hippo信号通路的关键蛋白,上调MST1蛋白表达,激活LATS1,活化的LATS1进而调控下游靶点YAP表达,将其磷酸化,降低其含量,从而抑制到肝癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡的作用.
关键词：正肝方肝癌Hippo/YAP通路作用机制二乙基亚硝胺
资助基金：国家自然科学基金(32160141)湖北省自然科学基金(2022CFB173)湖北省教育厅科研项目(B2022101)深圳市科技计划项目(JCYJ20220530172804010)
论文发表日期：2025-04-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 799-809 )
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