精胺抑制巨噬细胞中GBP5介导的NLRP3炎性小体活化减轻感染肠道病毒71型的新生小鼠脏器损伤
田芷华
杨青青
陈欣
张方方
钟柏茂
曹虹
南方医科大学公共卫生学院//广东省热带病研究重点实验室,广东 广州 510515
摘要：目的 基于巨噬细胞中GBP5调控NLRP3炎症小体活化,探究精胺(Spm)治疗肠道病毒71型(EV71)感染引起的重症手足口病的机制.方法 体内实验:将3～5 d龄的BALB/c乳鼠随机分为对照组(CON组)、感染组(EV71组)、治疗组(SPM组),感染组和治疗组每只腹腔注射浓度为1×106半数组织培养感染剂量(TCID50)病毒液50 μL,治疗组在注射病毒3 d后注射100 μmol/L精胺50 μL,对照组腹腔注射无菌PBS 50 μL.观察小鼠状态1周,提取小鼠心、肝、肺及肾组织全蛋白、RNA及组织切片,Western blotting、qPCR检测小鼠组织GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平,HE染色观察小鼠组织损伤及炎症细胞浸润状况,免疫组化法观察组织巨噬细胞浸润情况及GBP5的表达水平.体外实验:分别设置对照组(CON组)、感染组(EV71组)、治疗组(SPM组)、多胺生物合成抑制剂组.提取THP-1及RAW细胞RNA,通过RT-PCR检测细胞GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平.结果 与对照组相比,小鼠在感染EV71后心、肝、肺及肾组织出现明显损伤,其中心、肺组织中明显观察到巨噬细胞的浸润.心、肝、肺及肾组织中GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达水平明显升高(P<0.05);经精胺治疗后,与感染组相比治疗组小鼠组织损伤明显改善,心、肺组织中的巨噬细胞浸润减少.精胺治疗后小鼠心、肝、肺及肾组织中NLRP3、GBP5、CXCL10、TNFSF10表达水平降低(P<0.05).在THP-1及RAW细胞中发现,感染EV71病毒后GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达升高(P<0.05),经精胺治疗后细胞中GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达降低(P<0.05).在THP-1细胞中使用多胺生物合成抑制剂减少精胺合成可改善由GBP5 siRNA干扰引起的GBP5、NLRP3、CXCL10、TNFSF10表达降低(P<0.05).结论 精胺治疗可以降低EV71感染引起的巨噬细胞中GBP5介导的NLRP3炎症小体活化,减少炎症因子释放从而发挥治疗儿童重症手足口病的作用.
关键词：重症手足口病肠道病毒71型NLRP3GBP5巨噬细胞精胺
资助基金：广东省基础与应用基础研究项目(2021B1515140002)东莞市科技计划(20231800940142)
论文发表日期：2025-05-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 901-910 )
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