旱莲苷A通过调控JAK2/STAT3通路抑制M1型巨噬细胞极化改善葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠结肠炎
牛民主1
殷丽霞2
乔通3
尹林2
张可妮2
胡建国4
宋传旺3
耿志军5
李静4
1.蚌埠医科大学第一附属医院 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233004;蚌埠医科大学检验医学院免疫学教研室,安徽 蚌埠 233030;安徽医科大学附属宿州医院输血科,安徽 宿州 2340002.蚌埠医科大学第一附属医院 检验科,安徽 蚌埠 2330043.蚌埠医科大学检验医学院免疫学教研室,安徽 蚌埠 2330304.蚌埠医科大学第一附属医院 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233004;蚌埠医科大学第一附属医院 检验科,安徽 蚌埠 2330045.蚌埠医科大学第一附属医院 炎症相关性疾病基础与转化研究安徽省重点实验室,安徽 蚌埠 233004;蚌埠医科大学第一附属医院 中心实验室,安徽 蚌埠 233004
摘要：目的 探讨旱莲苷A(ESA)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)模型的影响及其对巨噬细胞极化的作用机制.方法 体内实验采用24只8～10周龄雄性C57BL/6小鼠,随机分成对照组(WT组)、2.5%DSS诱导模型组(DSS组)、ESA治疗组(DSS+ESA组,50 mg/kg),8只/组.每日记录小鼠体质量,观察粪便性状,通过DAI评分、结肠长度、脾指数、结肠组织HE染色及组织炎症评分、ELISA和RT-qPCR检测的肠黏膜炎症介质(TNF-α、IL-6和iNOS)水平评估ESA对小鼠肠炎症状的影响;采用AB-PAS染色标记杯状细胞,免疫荧光和Western blotting检测紧密连接蛋白水平(ZO-1和Claudin-1),评估ESA对小鼠肠道屏障的作用.体外培养小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7,分为Control组(M0组)、LPS(1 μg/mL)+IFN-γ(20 ng/mL)诱导组(M1组)和ESA治疗组(ESA组,50 μmol/L),采用流式细胞术评估ESA对小鼠肠系膜淋巴结及体外模型M1型极化标志物(CD86)比例的影响.Western blotting检测JAK2/STAT3通路关键蛋白表达,并使用信号通路激活剂RO8191(20 μmol/L)干预,分析ESA调控巨噬细胞极化的分子机制.结果 体内实验显示,ESA可明显缓解DSS诱导的小鼠体质量下降、结肠长度缩短及DAI评分、脾指数、组织炎症评分的升高(P<0.05);HE结果显示,ESA可保护肠道固有层,减轻肠道炎症细胞浸润;ELISA和RT-qPCR显示,ESA可抑制DSS诱导的小鼠肠黏膜组织相关炎症介质(TNF-α、IL-6和iNOS)的高表达(P<0.05);AB-PAS和免疫荧光结果显示,ESA可保护结肠组织杯状细胞、黏液屏障和机械屏障的损伤.流式细胞术结果发现,ESA可降低DSS诱导的小鼠肠系膜淋巴结和体外诱导的M1型巨噬细胞极化标志物(CD86)的阳性比例(P<0.05).Western blotting结果显示,体内外ESA治疗组p-JAK2和p-STAT3水平低于诱导组(P<0.05);体外经JAK2/STAT3激活剂RO8191干预后显示,ESA药物治疗未能抑制JAK2/STAT3信号通路活化,同时M1型极化标志物CD86阳性比例增加(P<0.05).结论 ESA可靶向拮抗JAK2/STAT3通路活化介导的M1型巨噬细胞极化,抑制炎症因子导致的肠道屏障的损伤,从而缓解DSS诱导的小鼠结肠炎.
关键词：旱莲苷A炎症性肠病肠屏障巨噬细胞极化JAK2/STAT3
资助基金：安徽高校自然科学研究项目(2022AH030138)安徽省临床医学研究转化项目(202427b10020088)蚌埠医科大学第一附属医院基金项目(BYYFY2022TD002)
论文发表日期：2025-06-20
在线出版日期：2025-08-15（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：10( 1297-1306 )
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