肉桂酸通过抑制TLR4减轻阿霉素诱导的小鼠心肌损伤铁死亡的发生
云琦1
杜若丽2
贺玉莹1
张贻欣3
王佳慧2
叶红伟2
李正红1
高琴2
1.蚌埠医科大学 生命科学学院,安徽 蚌埠 233030;蚌埠医科大学 安徽省神经再生技术与医用新材料工程研究中心,安徽 蚌埠 2330302.蚌埠医科大学 心脑血管疾病基础与临床重点实验室,安徽 蚌埠 233030;蚌埠医科大学 生理学教研室,安徽 蚌埠 2330303.蚌埠医科大学 临床医学院,安徽 蚌埠 233030
摘要：目的 基于网络药理学技术结合动物实验探讨肉桂酸(CA)改善阿霉素心肌损伤(DIC)的可能机制.方法 采用网络药理学分析得到CA改善DIC的关键靶点,并通过分子对接进行验证.6～8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠被随机分为5组(6只/组):Sham组、阿霉素(DOX)组、CA(25 mg/kg)+DOX组、CA(50 mg/kg)+DOX组、CA(100 mg/kg)+DOX和铁死亡抑制剂(Ferrostatin-1 5 mg/kg)+DOX组.超声心动图和HE染色观察心肌组织病理变化;检测小鼠血清 CK-MB、LDH、MDA、IL-6、TNF-α和心肌ROS水平.蛋白免疫印迹检测心肌组织中TLR4及铁死亡通路相关蛋白表达水平.构建慢病毒介导的基因稳定敲低TLR4的小鼠心肌HL-1细胞株,细胞分为6组:阴性对照组(NC);DOX模型组(DOX);铁死亡诱导剂组(Erastin);低表达组(si-TLR4组);DOX+si-TLR4组;Erastin+si-TLR4组.CCK8测定细胞活力;荧光探针检测细胞ROS含量变化;免疫荧光检测GPX4蛋白的表达.结果 通过网络药理学分析获得交集靶点28个,KEGG富集分析显示,CA可能通过Toll样受体信号通路作用于DIC.动物实验显示,与Sham组相比,DOX组超声心动图和HE染色结果显示心脏损伤,血清CK-MB、LDH、MDA、炎症因子和心肌ROS水平升高(P<0.01),SLC7A11和GPX4蛋白表达降低,TLR4和PTGS2蛋白表达升高(P<0.05).经CA处理后,心超功能指标水平升高(P<0.05);血清 CK-MB、LDH、MDA、炎症因子和心肌ROS水平降低(P<0.05);CA和铁死亡抑制剂使心肌组织SLC7A11和GPX4蛋白表达升高,TLR4和PTGS2蛋白表达降低(P<0.05).低表达TLR4细胞株中,与NC组相比,DOX组和Erastin组细胞,ROS水平升高(P<0.001),GPX4蛋白表达降低(P<0.001);与DOX组和Erastin组相比,DOX+si-TLR4组和Erastin+si-TLR4组细胞ROS水平降低(P<0.05),GPX4蛋白表达升高(P<0.01).结论 CA减轻小鼠DIC,其机制可能与抑制TLR4减轻铁死亡有关.
关键词：肉桂酸阿霉素心肌损伤铁死亡TLR4网络药理学
资助基金：国家级大学生创新创业训练计划项目(202410367058)蚌埠医科大学研究生科研创新项目(Byycx23003)安徽省优秀科研创新团队项目(2022AH010083)
论文发表日期：2025-09-20
在线出版日期：2025-10-10（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：13( 1946-1958 )
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