低强度脉冲超声协同冬凌草甲素通过激活PIEZO1诱导胰腺癌细胞铁死亡的机制
孙陛航1
郭煜君1
祁玉麟2
姚丹1
陈文直1
陈念芝1
1.重庆医科大学超声医学工程国家重点实验室//生物医学工程学院,重庆 4000162.成都中医药大学附属医院,四川 成都 610075
摘要：目的 基于铁死亡探讨冬凌草甲素(Ori)对胰腺癌的影响,以及低强度脉冲超声(LIPUS)在协同增效中的作用机制.方法 体外实验首先分为对照组、不同浓度的Ori组,通过CCK-8法检测不同浓度Ori对PANC-1增殖活力的影响.其次实验分为对照组、Ori组,通过流式细胞术检测细胞内Fe2+、ROS含量,试剂盒检测细胞内二醛(MDA)、而谷胱甘肽(GSH)和三磷酸腺苷(ATP)浓度,Western blotting检测细胞内GPX4、Nrf2、HO-1蛋白表达.随后分为对照组、铁死亡抑制剂组(Fer-1)、Ori组以及Ori联合Fer-1组,通过CCK-8法检测各组对PANC-1增殖活力的影响.最后分为对照组、Ori组、LIPUS组及联合组,通过Western blotting检测细胞内PIEZO1蛋白表达.体内实验构建C57BL/6J小鼠胰腺癌模型,实验分组分为对照组、Ori组、LIPUS组及联合组,通过检测皮下移植瘤小鼠肿瘤的苏木精-伊红染色(HE)、免疫组织化学Ki67染色评估肿瘤组织病理变化及细胞增殖活性,Western blotting及免疫荧光染色(IF)检测小鼠肿瘤内GPX4表达.结果 与对照组相比,Ori可以抑制PANC-1细胞增殖(P<0.001),细胞内Fe2+、ROS、MDA升高(P<0.05),GSH和ATP下降(P<0.001).与对照组相比,Ori组GPX4蛋白表达下降(P<0.01),HO-1、Nrf2蛋白表达升高(P<0.05).与Ori组相比,Ori联合LIPUS组细胞活力下降(P<0.01).比较各组皮下移植瘤小鼠肿瘤发现,与Ori组相比,Ori联合LIPUS组进一步抑制肿瘤的生长(P<0.01).Ki67染色表明联合组相较于Ori组细胞增殖活性更弱.与Ori组相比,联合组GPX4蛋白表达及荧光强度均更低(P<0.05).与对照组相比,LIPUS组和Ori组PIEZO1蛋白表达均升高(P<0.005),与Ori组相比,联合组PIEZO1蛋白表达升高更为显著(P<0.01).结论 LIPUS协同Ori通过激活PIEZO1,通过Nrf2/HO-1/GPX4通路促进胰腺癌细胞铁死亡.
关键词：低强度脉冲超声冬凌草甲素铁死亡PIEZO1胰腺癌
资助基金：中国博士后科学基金(2023MD734135)重庆市博士后科学基金项目(CSTB2023NSCQ-BHX0019)
论文发表日期：2025-10-20
在线出版日期：2025-11-03（本平台首次上网日期，不代表文献的发表时间）
页数：11( 2160-2170 )
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